《实验诊断学》实验报告
实验一 红细胞计数、白细胞计数
学 院： 专 业 年级： 学 号： 姓 名： 实验日期：
2015
一. 实验原理
1. 红细胞计数
用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算求得每升血液中的红细胞数量。
2. 白细胞计数
血液经白细胞稀释液稀释，成熟红细胞全被溶解，在显微镜下计数一定体积内白细胞数，换算出每升血液中白细胞数量。
二. 实验内容与步骤
1. 实验器材
改良Neubauer 计数板、显微镜、盖玻片、试管、微量吸管、移液管、洗耳球、生理盐水、RBC 稀释液、WBC 稀释液（冰乙酸3ml 、蒸馏97ml 、10g/L亚甲蓝溶液3滴 混合过滤后备用）
2. 实验步骤
（1）红细胞计数
1、取红细胞稀释液2.0ml 毫升，放入一小试管内。 2、用微量吸管吸至l0ul 处。
3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内， 上清液嗽洗吸管2-3次，立即摇匀。
4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。 5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。
6、待3~5分钟，让红细胞完全下沉后，将计数板平放在显微镜台上，用低倍镜观察，如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。
红细胞计数的区域： 中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个) 。 计数原则： 数上不数下，数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线) 上的红细胞，只计上侧与左侧线上的细胞，而压在下侧与右侧线上者不计入。
计算方式：
RBC/L＝5个中方格内RBC 数×5×10×200×106 ＝5个中方格内RBC 数/100×1012 参考值：
男 性：(4.0～5.5) ×1012/L 女 性：(3.5～5.0) ×1012/L 新生儿：(6.0～7.0) ×1012/L
（2）白细胞计数
1、 取小试管一支，加白细胞稀释液0.38ml 。
2、 用微量吸管准确吸收末梢血20ul , 擦去管外余血，将吸管插入试管中稀释液底部，轻轻将血液放出，并吸取上清液清洗吸管两次，混匀。
3、 待红细胞完全破坏，液体变为棕褐色后，再次混匀后充池，静置2~3min，待白细胞下沉。
4、 用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数，对压线细胞按“数上不数下、数左不数右”的原则进行计数。
计算方式：
WBC/L＝(4个大方格内WBC 数/4) ×10×20×106
＝(4个大方格内WBC 数/20)×109
参考区间：
成年男性：（3.97~9.15）×109/L 成年女性：（3.69~9.16 ）×109/L 儿童：（8~10）×109/L 婴儿：（11~12）×109/L 新生儿：20×109/L
三. 实验结果
红细胞计数实验结果如下图：
左上角方格
右下角方格
右上角方格 左下角方格
正中方格
表一红细胞分类计数表
左上角方格
42
RBC/L＝5个中方格内RBC 数×5×10×200×106 ＝5个中方格内RBC 数/100×1012
＝（42+130+224+84+80）/100×1012 ＝5.60×1012
本实验使用的血液标本来自于一52岁男性，成年男性红细胞量参考范围(4.0～5.5) ×1012/L。因此实验测得数据略大于正常范围。
右上角方格
130
右下角方格
224
左下角方格
84
正中方格
80
白细胞计数实验结果如下图：
右上角方格 左下角方格
右下角方格 左下角方格
表一红细胞分类计数表
左上角方格
51
右上角方格
80
右下角方格
81
左下角方格
103
WBC/L＝(4个大方格内WBC 数/4) ×10×20×106
＝(4个大方格内WBC 数/20)×109 ＝[(51+80+81+103) /20] ×109 =15.75×109
本实验使用的血液标本来自于一52岁男性，成年白性红细胞量参考范围（3.97~9.15）×109/L 。因此实验测得数据远大于正常范围。
四. 讨论 1. 红细胞计数：
本实验使用的血液标本来自于一52岁男性，测得红细胞量为 5.60×1012 。
成年男性红细胞量参考范围(4.0～5.5) ×1012/L。因此实验测得数据略大于正常范围。
就实验结果来说，只是略大于正常范围，应当可以接受。但是在实验过程中也出现了一些不规范的操作或失误。比如：在使用移液管时双眼未平视液面最底部与刻度线相切；在使用微量吸管的时候，吸取血液的量有偏差，而且在吸取上清液清洗微量吸管时，有少量上清液被吸入胶头，造成结果偏差；观察右下角方格中的红细胞时，发现其中有聚集在一起的红细胞团，推测可能是血液在微量吸管中时间过长，发生凝固，亦或是加入红细胞稀释剂后未搅拌均匀。
2. 白细胞计数：
本实验使用的血液标本来自于一52岁男性，测得白细胞量为15.75×109。成年白性红细胞量参考范围（3.97~9.15）×109/L 。因此实验测得数据远大于正常范围。
此实验结果大大超出了预计范围，一般来说，此实验中，白细胞数量偏高可能原因有两方面：一方面是实验操作失误，另一方面是被采血者处于病理状态。
实验中可能出现的失误有：
（1）用微量吸管吸取血液后未将吸管外周的血液擦拭干净。
（2）将稀释后的血液滴至计数板上是，血液未充满玻片与计数板之间的空隙，所以实验时又多加了一滴，可能造成结果偏差。
（3）移液管吸取0.38mL 稀释液至试管中时，可能有少量残余在移液管中，导致血液稀释倍数不够。
如果患者是因为病理原因出现白细胞数量过高可能的原因有： （1）细菌感染, 炎症
（2）寄生虫病、过敏性疾病及某些皮肤病 （3）慢性粒细胞白血病及慢性溶血性贫血