金线莲壮苗生根及炼苗移栽技术研究
摘要：[目的]筛选最佳金线莲壮苗生根培养基和移栽基质。 [方法]以金线莲为材料，以
1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L为基本培养基，在光照时间 12h／d ，光照强1200lx ，温度(25±2 ) ℃，pH 值为5．8培养条件下比较不同浓度椰子汁及香蕉提取物对金线莲生长状况的影响研究，并进行了移栽试验。[结果]筛选出壮苗生根最适宜培养基为1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L +椰子汁20%—25%；试管苗移栽适宜的基质为泥炭藓。
关键词：金线莲；试管苗；壮苗促根；移栽
金线莲[Anoectochilus roxburghii(Wal1.)Lindi]为兰科，开唇兰属花叶开唇兰
[1]
。在我国主要分布于广西、福建、台湾、浙江、江西、云南、贵州等地[2]。金线莲全
草均可入药，具有清热凉血、祛风利湿、强心等功效。民间多用于消炎、镇痛、治疗肺结核等多种疾病 ,均有很好疗效。近年来 ,金线莲用于治疗高血压、糖尿病、肝炎及肿瘤等疑难病症 ,日益引起医药界的重视。金线莲在民间素有“金草 ”、“神药 ”、“乌人参 ”等美称[3]。同时，金线莲株型小巧，叶型优美，叶脉金黄色，呈网状排列，也是观赏价值极高的室内观叶珍品[4]。
金线莲生长于海拔300～l 200 m的山地林下阴湿处，生态环境条件独特 ，自然繁殖率低，生长缓慢，尤其是近年来市场需求量猛增，加上人为的大量采挖及自然环境的严重破坏 ，使得其野生资源日渐枯竭[5]。对金线莲进行组织培养技术研究，建立经济、高效的种苗繁殖体系，对于解决种苗供需矛盾、野生资源保护和药用开发，都具有重要意义。但在生根壮苗等方面仍存在不少问题[6]，如苗长势弱、生长周期长、发根不均匀、移栽适应性差等。江建铭[7]等在金线莲组织快繁技术研究中得出，壮苗最适培养基为 1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L +香蕉提取物 20％(或椰子汁20％) ，但未研究提取物（香蕉提取物及椰子汁）的用量对金线莲壮苗生根的影响。鉴于此，本文就金线莲壮苗生根及炼苗移栽的过程进行研究。 1 材料和方法 1.1 材料
试验于-年-月-日在什么地方„„。金线莲增殖组培苗材料由黔南民族师范学院植物组织培养室提供。 1.2 方法
1.2.1 培养基的配制
1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L为基本培养基[7]，添加不同浓度的提取物（香蕉提取物、椰子汁），蔗糖浓度为3.0 %，琼脂浓度为0.7%，pH 值5.8，121℃高压灭菌20 min ，冷却备用。
表1 金线莲壮苗生根的培养基
培养基号 No.
基本培养基
Basic culture medium 椰子汁//% Coconut milk 香蕉//% Banana
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L 1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L 1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L 1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L 1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L 1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L 1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L 1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L 1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L 10 15 20 25 10 15 20 25
1.2.2 壮苗生根培养
选用生长一致的无根试管苗，在超净工作台上用剪刀将其剪成规格为带2片叶、长约2cm 的顶芽，随机接种到表1的各组培养基中，每组6瓶，每瓶接种3株。培养后每隔5d 观察生长情况一次，50d 后考察每株苗的发根数、根长、株高、新增芽数，并进行数理统计分析。 1.2.3炼苗及移栽
幼苗在生根培养基上培养35—50天，长至4—6cm ，丛生根有2—3条时，将瓶苗搬到炼苗室或阴凉通风处进行适应性炼苗。方法为打开培养瓶注入少量自来水，在半遮光下驯化3—5天[8]，然后小心地取出金线莲苗，避免伤到根部，用自来水洗净粘附在根上的培养基，以免培养基中的营养物质招致细菌或真菌繁殖生长，而使试管苗污染死亡。在1/2000甲基托布津液中浸泡10 min 后，晾干，栽入基质中，基质分为4个处理：腐殖土；腐殖土1份+珍珠岩1份；苔藓；泥炭藓。3个月后统计成活率，观察不同基质中苗的生长情况。
1.2.4管理施肥及病虫害防治
根据金线莲生长习性，温度控制在20-28℃，湿度保持在85%左右，光照保持在4000LX ，防止阳光直射，并经常保持叶面清洁。移栽20天后，需根据生长情况给小苗浇施营养液追肥。 2 结果与分析 2.1壮苗生根培养
本试验中，不同浓度添加物对金线莲壮苗生根的影响表现不一。结果见表2、表3。从试验中观察到，培养 10d后开始生根，从靠近培养基的每个节上长出 1～2条 ，呈肉质状，根比较短且不分支，其上有细密、乳白色根毛；15d 后，节上潜伏的叶腋芽萌动膨大，芽在节的四周萌出，起初为白色略带黄色，随着培养时间加长，芽不断伸展，逐渐转为绿色。
从表2、表3可知，椰子汁浓度在10—25%L的范围内时，随着椰子汁浓度的增加，发根数及根长明显增加，但差异均未达显著水平；椰子汁浓度为20%、25%时发根数与对 照相比，差异达极显著水平；椰子汁浓度为25%时，平均发根数及平均根长均达到最大
值，且根质量好，粗、壮。株高及新增芽数随椰子汁浓度的增加而增加，但差异均未达显著水平；株高与对照相比，差异达极显著水平；浓度为20%L时达到最大值，浓度为250g/L时反而减少。表明在本试验条件下椰子汁适宜添加的量为20—25%。
香蕉提取物浓度在10%—25%的范围内时，发根数及根长与对照相比差异均未达显著水平；发根数随浓度增加而增加，当浓度为15%时达最大值，大于15%时抑制根的分化，其中处理8号发根数与处理6号差异达极显著水平，与处理5号达显著水平；根长随浓度的增加而减小，当浓度为10%时达最大值，但根较细、弱，大于15%L时抑制根的生长，其中处理5号根长与处理8号差异达极显著水平，与处理7号达显著水平。株高及新增芽数随香蕉提取物浓度的增加而减小，其中处理5号株高与处理7、8号差异达极显著水平。表明在本试验条件下香蕉提取物适宜添加的量为10—15%。
从表2、表3可知，椰子汁较香蕉提取物对促进金线莲幼苗根的生长、株高及芽的影响更为明显。综合分析表明，适宜金线莲壮苗生根的培养基为1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L+椰子汁20-25%、1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L+香蕉提取物10—15%。
表2 不同浓度添加物对金线莲生根的影响
处理 号 1 2 3 4 5 6 7 8 9
发根数//条 根长//cm
平均 平均 2.6667 2.7778 3.1667 3.3333 2.1667 2.2222 1.5556 1.0556 2.0000
abc abc ab a cd bcd de e cde
ABCD ABC AB A BCDE ABCD DE E CDE
0.6111 0.6333 0.6444 0.7111 0.8222 0.6556 0.4944 0.3722 0.5944
abc abc abc ab a abc bc c abc
AB AB AB A A AB AB B AB
根生长状况 乳白色、较壮 乳白色、较壮 乳白色、粗、壮 乳白色、粗、壮 乳白色、细、长 黄白色、较壮 黄白色、弱 黄色、细、弱 乳白色、细、弱
综合评价 良 良 优 优 中 良 差 差 差
表3 不同浓度添加物对金线莲株高及新增芽的影响
株高//cm 新增芽数//个
处理
差异显著性(Tukey) 号
平均 平均 1 2 3 4 5 6 7 8 9
4.2333 4.5500 4.5667 4.5444 3.8444 3.4500 3.1889 3.0556 3.3889
ab a a a bc cd d d cd
AB A A A BC CD D D CD
1.9444 2.1111 2.2778 2.0556 0.5000 0.3889 0.3333 0.1111 1.2222
a a a a b b b b ab
A A A A B B B B AB
芽体生长状况
综合评价 良 良 优 优 良 差 差 差 中
色嫩绿、芽较壮 色嫩绿、芽较壮 色浓绿、芽粗壮 色浓绿、芽粗壮 色较绿，芽较弱 色嫩绿、芽较壮 色嫩绿、芽弱短 色黄白、芽细弱 色黄白、芽细弱
2.2不同基质对金线莲移栽的影响
表4 不同栽培基质对金线莲移栽成活率的影响
处理号 1 2 3 4
种植基质
腐殖土
腐殖土1份+珍珠岩1份 苔藓 泥炭藓
成活率//% 88.9 77.8 94.4 100
平均根长//cm 2.3 2 2.8 3.2
生长情况
叶片中等大，叶色绿 叶片小，基部叶片发黄
叶片中等大，叶色绿，茎杆较粗
叶片大，叶色深绿，叶脉清晰，茎粗壮
金线莲试管苗移栽3个月后的植株成活情况见表4。从表4中可以看出，在4种基质中，以泥炭藓最为理想，地下部分和地上部分生长都最旺盛，叶色深绿，叶脉清晰，成活率达100%。苔藓次之，腐殖土1份+珍珠岩1份的基质较差，叶片小，基部叶片易发黄，移栽1个月后顶端易枯死。 3小结与讨论
3.1不同浓度添加物对金线莲生根的影响
不同浓度添加物（椰子汁、香蕉提取物）对金线莲壮苗生根的影响表现不一。椰子汁较香蕉提取物对促进金线莲幼苗的生长的影响更为明显，椰子汁浓度为25%时，平均发根数达3.33条，根质量好，根粗、壮；香蕉提取物浓度为10%时平均根长达最大值
0.8222cm ，但根较细、弱。筛选出的壮苗生根最适宜培养基为
1/2MS+NAA3.0mg/L+6-BA0.5mg/L +椰子汁20%—25%。 3.2影响金线莲试管苗移栽的因素
不同栽培基质对金线莲试管苗移栽成活率的影响表现不一。本试验得出适宜金线莲移栽的基质为泥炭藓，移栽成活率达100%。
由于金线莲生长发育过程中对环境的光、温、水、肥、等因子有严格要求，因此在试管苗移栽过程中，应创造适合金线莲生长的环境条件。发育良好的根系是金线莲试管苗移栽成功的前提。 4 结语
金线莲是一种多年生珍稀名贵中草药，由于自然繁殖率低，现已濒临灭绝，对金线莲进行组织培养技术研究，建立经济、高效的种苗繁殖体系，对于解决种苗供需矛盾、野生资源保护和药用开发，都具有重要意义。随着研究的深入，金线莲必将呈现出更加广泛的应用前景。 附图:1-?
参考文献：
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