实验一 大黄中游离蒽醌的提取分离及鉴定
大黄种类繁多，优质大黄是蓼科植物掌叶大黄（RheumPalmatum.L）、 大黄R.officinale Baill）及唐古特大黄（R.tanguticum Maxiim et Regll）的根茎及根。
蒽醌类化合物在植物体内主要以苷的形式存在，其中有大黄酸-葡萄糖苷；大黄素甲醚-葡萄糖苷；芦荟大黄素-葡萄糖苷；大黄素-葡萄糖苷；大黄酸双葡萄糖苷等。
此外尚含鞣质类成分如葡萄糖没食子鞣质，儿茶鞣质、没食子酸等。 大黄中还含有属于双蒽酮的番泻苷A及番泻苷B。
蒽苷内服后有致泻、清热解毒作用，尤其是大黄酸葡萄糖苷有较强的致泻作用。游离的羟基蒽醌如大黄酸、大黄素有明显的抗菌活性。
1．大黄酸（
OH
O
OH
O
3．大黄素甲醚（Physcion）
OH
O
OH
H3CO
O
3
4．大黄酚（Chrysophanol
OH
O
OH
CH3
O
5．芦荟大黄素（Aloe emodin）
OH
O
OH
2OH
O
[目的要求]：
1．掌握蒽醌及蒽醌衍生物的理化性质及提取分离方法。 2．掌握双相酸水解的原理及操作。 3．掌握液－液萃取的原理及操作。 4．掌握制备薄层的原理及操作。 5．掌握蒽醌类成分的各类检识方法。 [实验原理]
（*此项内容由学生自行预习、归纳并整理） [实验内容]
一、大黄中总游离蒽醌成分的提取分离
1. 双相酸水解
2. pH梯度萃取法
3. 制备薄层分离
取沉淀Ⅲ适量，加甲醇1ml使溶解，条状点样于硅胶G制备薄层板上，以石油醚－乙酸乙酯（8：2）为展开剂，展开，取出，晾干，定位，刮取色谱带，用适量甲醇溶解，滤过，回收溶剂至干，依次得样品Ⅲa、Ⅲb、Ⅲc。
二、蒽醌类化合物的鉴定
1．化学检识
（1）Brontrager’s反应
取样品适量，加2％NaOH溶液数滴，观察颜色变化。 （2）醋酸镁反应
取样品适量，加乙醇数滴使溶解，滴加0.5％醋酸镁乙醇溶液数滴，观察颜色变化。
（3）浓硫酸反应
取样品适量，滴加浓硫酸，观察颜色变化。
2．薄层检识 吸附剂：硅胶G
展开剂：石油醚（60～90℃）－乙酸乙酯（8：2）
检视：先在紫外光灯（365nm）下观察，再用氨气熏蒸后观察。 3．紫外光谱测定
取样品适量，加色谱甲醇使溶解，作为供试品溶液，测紫外吸收光谱图。
[实验说明及注意事项]
1．注意碱液浓度及萃取时的静置时间对实验结果的影响。 2．加HCl酸化时产生气体，小心内容物溢出。 [思考题]
1．PH梯度萃取法的原理是什么？适用哪些中药化学成分的分离？
2．根据大黄中所含五种羟基蒽醌的结构，各游离蒽醌化合物的酸性及极性强弱应如何排列？说明为什么它们可以分别被不同强度的碱性水溶液提取出来？
3．根据大黄中游离蒽醌性质，除用双相酸水解法提取外，尚可用哪些提取方法？请设计一个详细工艺流程。
[预习要求]
1．根据实验目的要求归纳总结实验原理。
2．请根据本次实验流程列出实验所需试剂、试药，仪器及装置。3．推测实验现象及结果。