河南农业大学
本科生毕业论文（设计）
题 目学 院 园艺学院 专业班级 学 号 学生姓名 指导教师 撰写日期： 年 月 日（2010年4月 29 ）
日
茄子花蕾外形与小孢子发育时期对应关系研究（黑体小2号）
摘 要（黑体5号）： 通过研究6个茄子品种的花蕾外形与小孢子发育时期之间的对应关系，得出花蕾长度与萼裂基部长度之差为确定花蕾外形与小孢子对应关系的主要判断指标，当花蕾长度与萼裂基部长度之差在0-0．2 cm之间时，花蕾中花粉处于单核中晚期，此时最适合进行离体小孢子培养。花蕾长度、花蕾直径、花药长度、花冠颜色、花药颜色等不能做为直接的确定花蕾外形与小孢子发育关系的对应关系的指标，但可作为辅助判断指标使用。（宋体5号） 关键词（黑体5号）：茄子；花蕾外形；小孢子发育时期（宋体5号）
Research on Relationship Between the Configuration of Flower buds and Cytological Development Period of Their Microspores of Eggplant （Times New Roman3号）
Abstract（Times New Roman 5号加黑）：Researching on relationship between the
configuration of flower buds of six eggplant varieties and cytological development period of their microspores ,we obtained it 's main judgment indexes for definite the relationship between cytological development period of eggplant's microspore and the configuration of flower buds ,which is the errand between the length of flower buds and the base of calyx cracks. When its errand is between 0 and 0.2 cm, pollens in flower buds is monokaryotic mid and lateuninuc--leate stages, which is the best culture period for microspore culture . the length and diameter of flower buds、the length of anther、the color of chaplet and anther color can not be taken as direct index for definite the relationship between cytological development period of eggplant's microspore and the configuration of flower buds, but it may be taken as accessorial judgment index to use. （Times New Roman 5号）
Key words（Times New Roman 5号加黑）： eggplant; the configuration of flower buds;
cytological development period of eggplant 's microspores（Times New Roman 5号）
1引言（黑体4号）
茄子(Solanum melongena L．)古名伽、落苏、酪酥、昆仑瓜、小菰、紫膨亨，属于茄科(Solanaceae)茄属以浆果为产品的一年生草本植物，品种类型比较丰富，适应性强，产量高，供应期长，以食用嫩果为主。茄子起源于亚洲东南的印度、缅甸及其临近的热带地区，后传入我国，茄子在我国栽培已有干余年的历史，一般认为我国为茄子的第二起源地。茄子在我国南不同的长势下，花蕾的大小及小孢子发育时期相差较大。
[1]
花序对小孢子的发育时期也有较大影响。一般花序中，靠前的花，花蕾相对较大，靠后的花，花蕾相对较小。如果花蕾大小相当，靠前的花蕾，发育相对较早，靠后的花蕾，发育相对较晚
[23，24]
。
茄子在我国各地普遍栽培，是我国重要的栽培蔬菜之一。但近年来，由于种种原因，造成病害大面积发生，给茄子生产造成了严重的影响。解决这一问题的最根本方法就是要加大茄子抗病育种力度。但是应用常规杂交育种方法周期长，不能满足生产上对抗病品种的迫切需要。小孢子培养技术因可培养双单倍体的再生植株，把其应用于育种实践，可大大的缩短育种进程。已有多个文献证明，只有处于某个特定发育时期的花蕾，在进行离体培养时，才能进一步起动小孢子发育，对于茄子来说，亦是如此。因此采集处于适宜的小孢子发育时期的茄子花蕾就成为茄子小孢子培养能够获得成功的首要环节。但是由于基因形的影响，不同茄子品种的花蕾在外部形态上差异较大。如此，需要通过观察研究，找到一个统一的判定指标，以此来确定花蕾外形与小孢子发育时期的对应关系。
2 材料与方法（黑体4号）
2．1 材料（黑体小4）：
供试材料（见表1）种植在河南省绿金园农业有限公司示范园区内。
5）
Table 1 The Basic Situation of eggplant’s six Variety（Times New Roman 小5号）
（表种文字和数字一般为小5号宋体）
代号 1 2 3 4 5 6
品种名称 绿杂二号 精选绿茄 博杂一号巨圆茄 优美牛心茄 新济杂长茄九号 黑金刚长茄
品种来源
西安市绿色良种繁育中心 西安市炎圣种业公司 河南省豫园科技发展有限公司 西安市临潼绿色良种繁育中心 济南茄果良种研究中心 韩国平和种苗(济南三英销)
果实类型 绿卵圆 绿卵圆 紫圆 紫卵圆 紫长 紫长
表1 6个茄子参试品种的基本情况（黑体小
2．2 试验设备
游标卡尺、显微镜、Olimpas照相机
2．3 固定液及染色液的配置
2．3．1 固定液的配置
选用改良的卡诺固定液：6份95%乙醇+3份冰醋酸+1份氯仿。根据实验中的用量，配置适当的卡诺固定液。卡诺固定液要现配现用。 2．3．2 染色液的配置
3 结果与分析
3.1绿杂二号品种花蕾外形与小孢子发育时期的对应关系
花蕾的外部形态与小孢子发育时期之间确实存在一定的对应关系。一般情况下，对于同一
品种而言，花蕾相对较大(含花蕾长度与花蕾直径)、花药相对较长、花冠颜色与花药颜色相对较深、花萼裂开程度越大，小孢子发育时期就会相对较晚，反之，就会相对较早，但因受花蕾着生节位高低，花序中的前后，单株生长势等因素的影响，也不完全是这样。各参试品种测定观察结果见：表2-7。
表2 绿杂二号品种花蕾外形与小孢子发育时期的对应关系
Table 2 Relationship between the configuration of Flower buds of Luza No．2 eggplant Varieties and Cytological
Development Period of their 's Microspores
小孢子发育时期
花蕾 花蕾 萼裂基部长度 直径 长度 cm cm cm 1．890 0．920 1．550
1．470 1．148 1．012 0．912 1．020 1．102 1．124 1．138
花冠 花冠长与萼裂长度 基长之差 cm cm 1．476 -0．074 1．368 1．054 1．216 0．962 1．080 1．388 1．472 1．462
-0．102 -0．094 0．204 0．050 0．060 0．286 0．348 0．324
花药
长度 cm 0．680 0．614 0．580 0．668 0．572 0．630 0．892 0．894 0．884
花冠 颜色 淡绿 淡绿 淡黄绿 淡黄绿 淡黄绿 淡黄绿 淡黄绿 淡黄绿 淡黄绿
花药 颜色 淡黄绿 淡黄绿 淡黄绿 淡黄 淡黄 淡黄 淡黄 淡黄 淡黄
花萼开裂程度
未开 未开 稍开 稍开 稍开 稍开 开 开 开
四分体 1．992 0．830 时期
1．872 0．842
1．920 1．040
单核中 1．652 0．786 晚期
1．650 0．766
2．082 1．054
双核期 2．104 1．060
1．924 1．040
从表2中可以看出，花蕾长度、花蕾直径、花药长度整体上是长度越大，小孢子发育时期越晚，但由于开花部位高低不同，也不完全如此，如：单核中晚期的两个样花蕾长度为1．652、1．650，小于处于四分体时期的三个花蕾样；对于花冠颜色与花药颜色也是随着小孢子的生长发育，颜色越来越深，但也足以做为判断小孢子发育时期的指标；花萼开裂程度，也有一个发展规律，就是随着花蕾的发育，萼片逐渐展开。只有花冠长度与萼裂基部长度之差可以比较明显的表示出花蕾所处的小孢子发育时期，如：四分体时期，这三个数都为负数，即是花冠长度要小于萼裂基部长度；单核中晚期，这三个数基本上处于0-0．2 cm之间(只有一个略大于0．2 cm)。双核期，这三个数都大于0．2 cm。
4．结论与讨论
4．1结论
花蕾外形与小孢子发育时期具有一定对应关系，这些对应关系可用形态指标来进行确定。花蕾长度、花蕾直径、花药长度、花蕾颜色、花药颜色、花萼开裂程度可以做为辅助的指标来确定花蕾外形与小孢子发育时期之间的对应关系，但用来直接判断两者之间的对应关系往往并不可靠。
判断花蕾外形与小孢子发育时期之间对应关系较为可靠和直接的方法是利用花蕾长度和萼裂基部长度之差，如果花冠长度小于萼裂基部长度，则大部分花蕾处于四分体时期；，如果花蕾长度大于萼裂基部长度，并且这个差值在0-0．2 cm之间时，大部分花蕾处于单核中晚期；如
果这个差值大于0．2 cm时，大部分花蕾处于双核期或花粉已成熟。因此可以利用这个指标来选择适宜进行小孢子培养的花蕾。
4．2 讨 论
1、由于受开花时期、基因型、外界条件、花序等因素的影响，利用花蕾长度，花蕾直径、花药长度等绝对数值来判断花蕾外形与小孢子发育时期的对应关系并不可靠，应该找到一个如花蕾长度与萼裂基部长度之差这样的相对数值来确定这种对应关系。
2、在利用花冠长度与萼裂基部长度之差在0-0．2 cm之间这一结论来采集要进行小孢子培养的花蕾时，要尽量选择两者之间差值稍大一点的，因为如果这个差值较小，比如在0 cm附近，所采集的花蕾中可能会有部分花粉处于四分体时期，而如果这个数值稍大一点，比如0．1-0．2 cm间，可能会有部分花粉处于双核期，但也会是处在双核早期，此时的花粉发育还不会成熟，有报道说，茄子花粉小孢子发育时期处于单核中期至双核早期时都可以进行离体小孢子培养。
3、由于开花时期是一个确定花蕾外形与小孢子发育时期之间对应关系的主要影响因素，所以在做小孢子培养时，采集处于不同开花时期的花蕾，在培养前仍然需要观察确定二者之间的对应关系。
4、对于长茄和线茄等基因型而言，由于其多数具有花序，在同一个花序中，较早的花蕾和较晚的花蕾无论在大小上，还是在小孢子发育时期上都明显的不同，同时较晚的花蕾可能小孢子还存在一定的败育现象，所以在采集这样的样品茄子花蕾时，最好是采集花序中较早的花蕾。
参考文献（黑体4号）
[1] 张振贤.蔬菜栽培学[M].北京:中国农业大学出版社，2003（宋体5号）
[2] 北京市农业科学院蔬菜研究所单倍体组．中国科学院北京植物研究所五室形态组．茄
子花药培养的研究[J]．植物学报，1975，17(4)：323-324
[3] 曹家树，余小林，黄爱军,等．2000．提高白菜离体培养植株再生频率的研究[J]．园
艺学报，27(6)：452-454 [4] 成细华，刘凡．大白菜真叶的组织培养及植株再生[J]．植物生理学通讯，2001，37(4 )：
314-311 [5] 李文泽，胡含，等．在花药花粉培养中预处理的作用机理[J]．遗传HEREDITAS (Beijing)
17(增刊) 1995 ：13-18
[6] 袁亦楠，朱德蔚，连勇，等．番茄游离小小孢子培养形成胚状体的初步研究[J]．农业
生物技术学报，1999，7（1）：85－88
[7] Lichter R．Induction of haploid plants from isolated pollen of Brassica rapus． Z
Pflanzenphysiol，1982，105：427－431 （Times New Roman 5号）
[8] Sibi M， R Dumas de Vaulx， D Chambonnet． Obtention de plantes haploids par
androgenesis in vitro chezle piment(Capsicum annuum L) Ann． Amelior[J]． Plants，1979，(29)：583-606（Times New Roman 5号）
[9] 刘独臣．辣椒花药培养和小孢子培养研究[D]．四川农业大学，硕士学位论文2003，6 [10] 王烨．辣椒游离小孢子培养及其显微观察[D]．中国农业科学院，硕士学位论文，2004，
6
[11] 邹金美．大白菜花药及游离小孢子培养技术体系的研究[D]．华中农业大学，硕士学
位论文，2003，6
[12] 曹鸣庆，李岩，刘凡，等．基因型和供体植株生长环境对大白菜游离小抱子胚胎发生
的影响[J]．华北农学报，1993，8(4)：1-6
[13] 董艳荣，龚义勤．茄果类蔬菜花药和花粉培养研究进展[J]．长江蔬菜，2001(5)：30-32． [14] 马欣．茄子游离小孢子培养及其形态发育学观察[D]．河北农业大学，硕士学位论文，
2006，6
[15] 范适．茄子小孢子培养研究[D]．湖南农业大学，硕士学位论文，2003．6
致 谢（黑体4号）
感谢河南农业大学尤其是园艺学院的各位老师两年来给予我的辛勤培养和悉心指导，使我受益匪浅，在此，我向他们表示由衷的谢意；感谢孙治强老师和齐卫强师兄在实习期间给予我的关照、关心、帮助与指导，使我学到了很多的理论知识和实践技能，以助我能顺利地完成实习计划及毕业论文，在此我向他们致谢；感谢范娜、阮云飞、卢继峰等师长们的关心照顾和大力协助；同时也感谢我的父母对我生活和学习上的支持，是他们的付出使我才能够得以顺利的完成学业，谢谢!