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志贺氏菌研究及其快速检测技术发展现状
黄宝华庞广昌
（天津市食品生物技术重点实验室 天津商学院生物工程系
志贺氏菌是最常见的肠杆菌科的病原菌
随着科学技术的发展
使得致病菌的检测技术日新月异
立应用于食品及牛奶中的一种快速
以期能够建
因此
关键词
快速检测技术
ＣＨＥＮ Ｑｉｎｇ－ｓｅｎ＊
Ｓｈｉｇｅｌｌａ，ｔｈｅｍｏｓｔｒｅｇｕｌａｒｐａｔｈｏｇｅｎｉｎＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ，ｃｏｕｌｄｅａｓｉｌｙｃａｕｓｅｈｕｍａｎｅｎｔｅｒｉｃｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ｓｏｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓ
ｔｈａｔ ｃｏｕｌｄ ｅｘａｃｔｌｙ ａｎｄ ｑｕｉｃｋｌｙ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｔｈｉｓ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｄｉｓｐｌａｙ ｍｏｒｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｉｎ ｆｏｏｄ ｉｎｄｕｓｔｒｙ．Ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｍｏｄｅｒｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｈｕｍａｎａｔｔａｃｈｅｄｔｈｅｉｒｉｍｐｏｒｔａｎｃｅｔｏｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｌｉｆｅｑｕａｌｉｔｙ，ｔｈｅｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｔｏｌｉｆｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｗａｓａｂｓｏｌｕｔｅｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｅｖｅｒ ｂｅｆｏｒｅ，ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｍｏｄｅｒｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｂｒｏｕｇｈｔ ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅａｓｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ．Ｔｈｉｓ ａｒｔｉｃｌｅｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ ｓｏｍｅ ｍｅｔｈｏｄｓ，ｅｘｐｅｃｔｉｎｇ ｔｏ ｂｕｉｌｄ ａｓｙｓｔｅｍ ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｎｄ ｆａｓｔ ｃｈｅｃｋ ｕｐ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎ ｉｎ ｆｏｏｄ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ
ｆａｓｔ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ
ＴＳ２０７．４ 文献标识码
１００２－６６３０（２００４）１１－０３３３－０４
据国内综合资料
志贺氏菌既可通过水
据报道
根据ＷＨＯ年度报告
非
细菌性腹泻的病例多达１．５
我国广大农村地区由于卫生条件差报道
为及时有效地预防
腹泻等疾病流行的
不仅
起人类痢疾
人类对痢疾杆菌有很高的易感性
死亡率甚高为革兰氏阴性杆菌
无荚膜
５３ｇ分子％（Ｔｍ法）［１］
求不高
７．８
微凸
无色
宋内氏菌菌落一般较大
现扁平的粗糙型菌落
无菌膜形成
形灰
色
［２］
不溶血
［３］
大多不分解乳
糖，无动力
氧化酶
鼠李糖苯丙氨酸脱氨酶
脲酶
圆
培养
１８
边缘整
齐
并常出
最适温度为
３宽０．５有菌毛
ｍ
营养要
３
７
同时也是保障人民身体健康的必要手段
是细
菌性痢疾的病原菌
有志贺氏菌
还有阿米巴原虫
变形杆菌
以及病毒等均可引
肌醇
Ｐ
试验
2004-07-12 *ͨѶÁªÏµÈË
»ù½ðÏîÄ¿万方数据
»Æ±¦»ª
(1979-)ÔÚ¶ÁÑо¿Éú
2004, Vol. 25, No. 11
食品科学
明胶均为阴性；硝酸盐还原，甲
基红
靛基质均为阳性
［４］
可分为
二大组
不分解甘露醇组
又根据能
否产生靛基质３
５
９
７
Ｂ
包括福氏
宋内氏菌
分为迟缓分解乳糖的宋内氏和不分
解乳糖的福氏和鲍氏菌
分靛基质阳性
（福氏菌１
３
５
型和鲍
氏菌
５
９
１３
２
４
８
１２
（见图
１）
主要抗原有三种
型多糖抗原为菌体抗原的一
种
当菌株变为粗糙型
时
各菌型所含的型抗原不同
群特异性抗原
也是菌
体抗原的一种常在数种近似的菌内出
现
由于所含群抗原不同如福氏菌
２
型
可分成
２ａ
表面抗原
（Ｋ
抗原）
不耐热
／１ｈ
即被破坏
可阻止菌体抗原与相应免疫血清发生凝
集
［５］
按最新国际分类法３９
个血清型
（包括亚型
）［６］
（见表１）
也称志贺氏菌群
不发
酵甘露醇与其他各群细菌无血清
学联系
也称福氏菌群
万方数据
１０
福氏菌
Ｂ
１
１ｂ２ｂｘ
３ｃ
４ｂ
鲍氏菌Ｃ１宋内氏菌
Ｄ
１
＋
＋
和变种）
４ｃ
发酵甘
露醇
抗原结构较复杂
每一福氏菌型具有二种抗原
前者只存在于同型菌株中
存在于福氏各菌型中
尚含有４Ｃ
群
有１５
个血清型无鸟氨酸脱羧酶Ｄ
群
仅有一个血清型
有鸟氨酸脱羧酶
有
相之分［７，８］
以宋内氏最
强
志贺氏菌最弱
３７
在
粪便内（室温）存活
１１ｄ
５６１０ｍｉｎ
即被杀死
１％
石炭
酸中１５对氯霉素
链霉素
敏感
自从广泛使用抗菌素以来
给防治工作带来许多困难
１９７４）
氯霉素
７３．６％
链霉素
８４％
合霉素
７５％
磺胺类
９７％
可见对国内
常用几种抗菌素的耐药率相当高
在病原微生物和环境微生物中
因此质粒成为我们对微
生物研究的重要内容
［９］
志
贺氏菌的侵袭力是由质粒控制的
随后
当
将菌株中的质粒消除之后
而
质粒未消除者其耐药性没有明显变化［１１］
人类对生活的质量提出了越
来越高的要求
335
µÃµ½Á˿Ƽ¼½çºÍÕþ¸
µÄ¸ß¶ÈÖØÊÓ
ÒÔÃâÒßѧ·½·¨½¨Á¢µÄ¼ì²â¼¼ÊõÈçøÃâ
Ò߲ⶨ¼¼Êõ(ELA)ºÍSPA·¨
¾ÛºÏøÁ´·´Ó¦(polymerase
chain reaction)ºÍËæ»úÒýÎïDNAÀÔöµÄ¶à̬ÐÔ(RAPD)µÄ¼ì²â¼¼Êõ
而无法检测
不同种的菌株
该技术也可用于志贺氏菌的鉴
定［１５］
为快速检测致病菌提供了关键性的
Æä¼ì²âµÄ΢Á¿
»¯ºÍ×Ô¶¯»¯²»Í¬²¡Ô-ÌåµÄ»¯Ñ§×é³É»òËù²úÉúµÄ´úл²úÎï¸÷Òì
¿ÉÒÔ¶Ôϸ¾ú½øÐÐ
¼ø¶¨·´Ó¦Ñ¸ËÙ
ÇÒ¼ì²â²½Öè·±Ëö［１２］
气相色谱
和高效液相色谱也应用到致病微生物的检测中
其中以气相色谱应用较多
快速
但使用的仪器设备相对来说比较昂
贵
微生物专有酶快速反应也可进行细菌的快速检测
使得
检测结果直观反映只需５ｍｉｎ
该
法虽然快速３．２
分子生物学在志贺氏菌快速检测技术上的应用随着微生物学
对病原微生物的鉴定已不再局限于对它的形态结构
和生理特性等一般检验上
特别是核酸结构及其组成部分
核酸探针
ＲＡＰ
Ｄ
快速
逐渐应用于食源性致病原菌的检测
且核酸之间的识别连接比抗原抗体准确
另外ＰＣＲ技术往往
与探针联合使用进行菌种鉴定
可先将靶ＤＮＡ序列扩
增使其达到足够的检测量志贺氏菌检测方法
存在着治理容易丢失和受内源菌干扰的问题１９９５年王军等人
在检测粪便中志贺氏菌和侵袭性大肠杆菌的实验中
其敏感性可达
对常规检测来
说太繁琐
如检测
一种菌就需要制备一种探针
有时会因样品中不含产毒素
技术方法
从以前的经典免疫学技术如凝集实验
2004, Vol. 25, No. 11
食品科学
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严重危害人们的身体健康
引起
的传染作用是非常大的［８］
因此
据国家统计局发布的快报［９］
销售收入３４０亿元因此该产品［１０］徐平， 等． 酶联免疫吸附试验在检测志贺氏菌侵袭力中
的应用［Ｊ］． ２０００， （３）： １９３．
的研制对国内牛奶行业迅速发展的现状是非常必要的
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献
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分型
以及对抗菌药物的敏感性试验［Ｊ］． 实验动物科学与管理，
今后５年甘肃省即将建国家级食品工业城
小麦产业是甘肃省农产品加工的支撑产业
我省乡镇企业小麦加工业要以河西地区
源和水川区等小麦主产区为布局优势区域
大力发展多种专用面粉
制品
糕点
速冻水饺
预混合面粉和营养强化面粉
加大小麦戊聚糖
提高产品技术含量
今后５
年
陇南（包括天水）旱
要在提高总出粉率
各种方便面
对现有面粉加工企业进行技术改造和资产重组
能耗高的小型面粉厂适当控制发展
食用油今起行新规
不能再贴
之后生产的所有食
用油必须贴上新标准的等级标签１０月１日后将被禁止销售
压榨浸出不再以色拉油原料
是否使用转基因大豆也要说明
志贺氏菌研究及其快速检测技术发展现状
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
黄宝华， 陈庆森， 庞广昌
天津市食品生物技术重点实验室,天津商学院生物工程系,天津,300134食品科学FOOD SCIENCE2004,25(11)11次
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