草鱼肠炎病病原菌的分离鉴定
摘要：根据患病草鱼(Ctenopharyngodon idellus) 的临床症状，解剖分析，初步判断为草鱼肠炎病。为确诊该病，从患病草鱼采集组织进行实验室检查，分离得到病原菌CQWL001，按常规方法进行形态特征、培养特性、主要生化及动物试验，确定该病的病原菌为肠型点状气单胞菌。
关键词：草鱼；肠型点状气单胞菌；分离；鉴定
草鱼肠炎病是一种由致病菌引起的常见传染病，发病频率很高，对水产养殖危害特别严重[1]。已有研究表明，引起草鱼肠炎疾病的细菌主要为气单胞菌属，包括嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、豚鼠气单胞菌，单独或混合感染引发肠炎[2]。本研究对临床症状为肠炎的草鱼进行解剖，分离后得到1株草鱼肠炎病病原菌，通过形态学观察、染色特性、生化试验等方法对其进行鉴定，并对其进行了人工回归感染试验，旨在初步弄清草鱼肠炎病病原菌的菌属问题，为诊断和防治该病提供依据。
1材料与方法
1.1材料
患肠炎病草鱼取自重庆市永川区双竹渔场，带回实验室进行分离培养。健康草鱼购自重庆市永川区双竹渔场，平均体重为35±5 g，在实验室内驯养1周后用于试验。驯养和试验期间，每日以自制人工饵料喂食1次，养殖用水为曝气6 d的自来水，pH 值7.2，水温22±1℃，溶氧7.3～8.1 mg·L-1。肠杆菌科细菌生化鉴定管及其他细菌生化鉴定所需试剂购自中国人民解放军浙江省军区后勤部卫生防疫检验所；常规药品均为本实验室自备。
1.2方法
1.2.1病原菌的分离纯化无菌条件下解剖濒临死亡的患肠炎病的草鱼，采集病鱼鳃、肝、肾和腹水，用研钵碾碎组织并制成组织悬液，挑取组织悬液在普通琼脂平板上划线，37℃培养过夜，挑选形态结构、颜色相同的单个菌落，在平板上再次划线分离纯化。斜面中生理盐水保存4℃备用。
1.2.2病原菌的形态学观察观察分离纯化的菌落形态并进行涂片，革兰氏染色，硝酸银鞭毛染色，光学显微镜观察。用标准测微尺测定病原菌大小。
1.2.3病原菌的鉴定将分离纯化的病原菌接种于各种鉴定试剂管和配置的营养液中，37℃过夜培养，根据标准管比较观察结果。病原菌鉴定参考伯杰氏