载体去磷酸化步骤
1、加过量酶将载体完全线性化（5小时。先取3ul 进行鉴定，如果没有酶切完全可再加入酶继续切）。
2、65度，20分钟，使酶失活。
3、向酶切体系中（50ul ）加入2ul CIAP，37度1小时。
注：有些人喜欢结束第1步（即酶切）后，跑电泳，再回收（即提纯），然后再加入CIAP 。若是这种情况，在加入2ul CIAP的同时，还需加入5ul 的10*CIAP buffer 。但由于原酶切体系中加入的buffer 已含有CIAP buffer中的成份，所以个人认为结束第1步后不用回收载体，可以直接利用酶切体系中的buffer ，不用额外加入CIAP buffer。如果在此回收，会损失一部分载体）。
4、电泳、切胶、回收载体。