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利用人工种子技术快速繁殖白及
作者:李伟平 田莎莎 鲁光耀 吕迪 王鸯妮 蒋福升 丁志山
来源:《中国中药杂志》2012年第22期
[摘要] 目的:建立白及人工种子的制作方法,并考察相关影响因素,为白及的繁育提供一条新途径。方法:以白及种子为材料,在1/2MS 培养液中萌发后作为人工种子的包埋材料,研究了人工胚乳组分、人工种皮基质、贮藏条件、萌发基质等对人工种子萌发率和成苗率的影响。结果:以4.0%海藻酸钠+0.2 mol·L-1CaCl2+0.4 mg·L-1青霉素+0.3%多菌灵粉剂+0.2%苯甲酸钠为人工种皮基质,MS+1.0 mg·L-1NAA+2.0 mg·L-1KT作为人工胚乳成分制成的人工种子,其生长速度和成苗率最高。人工种子在4 ℃条件下贮藏较长时间还可保持较高的活力。结论:通过研究确立了白及人工种子制作基本技术,但其在有菌环境中的播种技术还有待进一步研究改进。
[关键词] 白及;人工种子;快繁;贮藏
白及为兰科植物白及Bletilla striata (Thunb.) Reiehb. f.的干燥块茎,具有收敛止血,消肿生肌等功效,常用于治疗咯血,吐血,外伤出血,疮疡肿毒,皮肤皲裂等[1-2]。现代药理实验研究表明,白及还具有抗肿瘤[3]、抗菌[4]等药理作用,此外,白及还是天然的化妆品原料,及其他重要的工业辅料;随着白及应用的不断拓展,其需求量不断增加,然而,由于其种子发育不完全,在自然条件下很难正常萌发,主要靠块茎繁殖,繁殖系数有限,因而使白及的产量很难满足产业的需求,致使其价格连年攀升。虽然已有不少白及组培快繁的相关研究报道[5],并且本实验室也建立了相关组培快繁体系,但总体上目前白及组培快繁体系尚不完善,再加上当前人力资源的短缺,远未适应产业的发展要求。因此,本文提出了一种白及新的种苗快繁途径——采用人工种子技术快速繁殖白及。
白及种子细小,没有胚乳,一个硕果中种子含量多达上万粒,这为人工种子制作提供了很好的繁殖体材料,极大降低了人工种子制备成本。为此,本文拟对白及人工种子“胚乳”配方及相关制备条件进行初步考察,以探讨白及人工种子快繁的可行性,为白及规模化、产业化发展奠定基础。
1 材料
1.1 试剂
MS粉培养基(BR,上海宇涵生物科技有限公司,批号110412);海藻酸钠(AR,天津市北联精细化学品开发有限公司,批号2009年6月06日);琼脂粉 (BR,国药集团化学试剂有限公司,批号F20091119);无水氯化钙(AR,杭州高晶细化工有限公司,批号2006年2月28日);6-苄基嘌呤AR,上海伯奥生物科技有限公司,批号080116);1-萘乙酸[AR,中国医药(集团)上海化学试剂公司,批号F20020528];2,4-二氯苯氧乙酸(AR,上海试四