高新技术
没石子酸丙酯和二丁基羟基甲苯含量测定研究
刘春芝
（重庆华邦制药有限公司，重庆 401121）
【摘 要】目的：建立一种高效液相色谱法同时测定没石子酸丙酯（PG）和二丁基羟基甲苯(BHT)含量。方法：采用高效液相色谱法，用Hypersil,ODS,250×4.6mm,5μm 色谱柱，以0.1%冰醋酸水溶液作为流动相A，0.1%乙腈溶液作为流动相B；进行梯度洗脱，检测波长280nm，流速1.0ml/min。结果：PG的线性范围为0.43μg/ml～2.15μg/ml，相关系数r=0.9999（n=5），BHT的线性范围为0.40μg/ml～2.02μg/ml，相关系数r=0.9999（n=5），高、中、低3个浓度平均回收率PG为98.7%，RSD为3.1%（n=9）、BHT为98.3%，RSD为3.2 %（n=9）。结论：本方法快速、简便、准确、专属性良好，可用于测定PG及BHT含量。
【关键词】没石子酸丙酯；二丁基羟基甲苯；含量；高效液相色谱法
中图分类号：G633.8 文献标识码：B 文章编号：1006-8465（2015）12-0019-01
PG作为抗氧化剂被广泛应用于油脂，油炸食品等，与BHT联用抗氧化能力更强，在新药研发过程中，为了增强易氧化原料药的稳定性，常加入抗氧化剂，在样品考察过程中监测抗氧化剂含量，能更好的控制产品质量，并对此方法进行了专属性、线性、重复性、精密度、回收率、稳定性等方面的方法学验证，结果显示本方法操作简单，专属性、重复性好，可用于PG及BHT含量的测定。 1 材料 1.1 仪器 LC-2010A型HPLC仪，包括紫外检测器，LC-solution色谱工作站等（日本岛津公司）；；XP205电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。 1.2 药品与试剂 PG对照品（重庆华邦制药有限公司，批号：XF120021）；BHT对照品（重庆华邦制药有限公司，批号：F005-1203042）；依折麦布辛伐他汀片（重庆华邦制药有限公司，规格：10mg，批号：2011001、2011002、2011003）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为去离子水。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 采用HPLC法测定PG及BHT的含量，色谱柱为Hypersil,ODS,250×4.6mm,5μm，流动相A为0.1%冰醋酸水溶液，流动相A为0.1%冰醋酸乙腈溶液，检测波长为280 nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，进样体积为100μl。
梯度洗脱条件：
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取PG及BHT对照品各约10mg，置100ml量瓶中，加50%乙腈水适量，超声使溶解，并稀释到刻度，摇匀，作为对照品贮备溶液。精密量取对照品贮备溶液5.0 ml，置
50ml量瓶中，加50%乙腈水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 取本品20片，精密称定，研细，精
密称取适量（约相当于辛伐他汀50mg），置25ml量瓶中，加50%
乙腈水适量，超声使溶解，并稀释到刻度，摇匀，滤过，即得。
2.2.3 空白辅料溶液的制备 取按照自制片处方配制空白片，照
“2.2.2”项下方法配制空白辅料溶液。
2.3 方法验证
2.3.1 专属性试验
取“2.2”项下的空白辅料溶液、PG对照品溶液、BHT对照品溶
液和供试品溶液，照“2.1”项下的色谱条件进样。结果表明，空白
辅料对PG及BHT测定无干扰，本方法专属性良好。
2.3.2 线性关系试验
精密量取“2.2.1”项下对照品储备液10ml，置50ml量瓶中，
加50%乙腈水稀释至刻度；作为线性对照品贮备液，分别精密量取
1.0、2.0、2.5、3.0、5.0ml，置50ml量瓶中，加50%乙腈水稀释至刻度，摇匀，即得线性溶液，照“2.1”项下的色谱条件进样测定，得峰面积（Y）。将Y与X作线性回归，PG回归方程为Y＝127127.25X-2369（r=0.9999）；BHT回归方程为Y＝68425X-652（r=0.9999）。结果表明，没食子酸丙酯浓度在0.43µg/ml～2.15µg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系。BHT浓度在0.40µg/ml～2.0µg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.3.3 溶液稳定性试验 将“2.2.2”项下的供试品溶液分别于室内避光放置0、4、8、16、24h后，照“2.1”项下的色谱条件进样，记录PG及BHT的峰面积，其PG峰面积的RSD=0.85%（n=5）；BHTRSD=0.41%（n=5）。
结果表明，供试品溶液在24h内稳定。 2.3.4 精密度试验 取同一批样品，按“2.2.2”项下的供试品溶液配制方法，配制6份相同浓度的供试品溶液，照 “2.1”项下的色谱条件测定，记录峰面积，6份PG含量平均值为98.3%，RSD为1.3%，BHT含量平均值为97.8%，RSD为0.9%。 2.3.5 中间精密度试验
取同一批样品，由不同人员在不同时间按“2.2.2”项下的供试品溶液配制方法，配制6份相同浓度的供试品溶液，用不同仪器照 “2.1”项下的色谱条件测定，记录峰面积，6份PG含量平均值为97.9%，RSD为0.8%，BHT含量平均值为98.1%，RSD为1.2%。结果，中间精密度良好。
2.3.6 回收率试验
称取空白辅料适量，共9 份，分别置于25ml量瓶中，分别精密加入“2.3.2”项下的对照品贮备液0.8 ml、1.2 ml、2.0 ml各3份，共9份，加50%乙腈水超声溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，照 “2.1”项下的色谱条件进样测定，计算回收率。结果表明，PG回收率在94.6%～102.6%之间，平均回收率为98.7%，RSD为3.1%（n=9）、BHT回收率在93.1%～101.2%之间，平均回收率为98.3%，RSD为3.2 %（n=9）。
2.4 样品测定
取3批样品，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，照 “2.1”项下的色谱条件进样，测定并计算每份含量。结果，3批样品PG含量分别为99.2%、98.6%、98.1%。BHT含量分别为98.5%、
99.2%、97.9%。 3 讨论 检测波长的选择 取PG对照品适量用50%的乙腈水稀释制成约含PG2μg/ml的溶液，在200～400nm波长处扫描，在280nm处有较大吸收，取BHT对照品适量用50%的乙腈水稀释制成约含BHT2μg/ml的溶液，在200～400nm波长处扫描，在280nm处有较大吸收，故选择280m作为测定波长。 综上所述，本方法快速、简便、准确，可用于同时测定PG及BHT的含量。 参考文献： [1]蔡梅,王勇,蔡美明.气相色谱法测定二丁基羟基甲苯的含量[J].海峡药学,2009(8). [2]国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版二部[M].北京:中国医药科技出版社.2015.12︱19︱