农杆菌LBA4404感受态的制备-微观世界-搜狐博客 - 范文中心

农杆菌LBA4404感受态的制备-微观世界-搜狐博客

08/17

农杆菌LBA4404感受态的制备

2009-09-11 09:44

从YEB平板上挑取单菌落接种于含50mg/lRif（利福平）、40mg/lStr（链霉素）的YEB液体培养基中，28度、220rpm摇荡过夜。

取上述过夜培养物0.5ml加入到50ml（含上抗生素）YEB培养基中，28度、280rpm快摇，使其OD600达到0.5左右（摇菌时间视菌种而定）。

将菌液水浴30min，4度、6000rpm离心10min，收集菌体，加入10ml预冷的0.15mol/lNaCl悬浮细胞。

4度、6000rpm离心10min。

弃上清，加入1ml预冷的20mmol/lCaCl2重悬细胞，分装于1.5ml离心管中，液氮中速冻，－70度保存。

20mmol/lCaCl2可以一次配置分装储存于－70度，一次一支


相关内容

  • 在阳光下生活-三品大官人-搜狐博客
    在阳光下生活 分类: 凡人生活 2007-03-24 16:23 我和我的好朋友都是生活在阳光下的人. 传媒应该多有一些阳光的心态. 要给世界带来一些美好的希望. 但在黑夜里翻白眼的,无非是些宵小之徒.他们习惯了黑夜,蠢蠢欲动,鬼鬼祟祟,令 ...
  • 遇事虚怀观一是 与人和气察群言-谈天说地 (众声)-搜狐博客
    遇事虚怀观一是  与人和气察群言 众声 生活中有些人处处爱计较,少淡忘,放不下.往往对一些人.一些事耿耿于怀.对方可能一时有错或许你自己本身也有错,说了一些出头的话,气话,狠话,做了一些过头的事.伤人的事.这在人生历史的漫漫长河中也是一种客 ...
  • 感受态制备注意事项
    关于大肠杆菌的感受态制备及转化的方法很多,最复杂的莫过于电转化,而最简单的则是将LB平板上的菌落直接挑入装有缓冲液的EP管冰箱即开始转化.对于做克隆工作的人而言,高而稳定的感受态可减轻不少麻烦. 现在大肠杆菌转化效率最高的要数电转化,可达到 ...
  • (原创)来自小沈阳家乡的人,谈小沈阳
    标签: 赵本山 二人转 姜昆 铁岭 沈阳 注:转贴需注明引用地址 (原创)来自小沈阳家乡的人,谈小沈阳 经受过几次央视枪毙的家乡人__小沈阳,今年随着时代的发展变化,在已变成为中华民族民俗内容中不可缺少一部分的CCTV央视春晚,小沈阳一夜成 ...
  • 五年级下册信息技术知识点泰山版
    第一单元电子邮件传真情 互联网上提供电子服务的常用网站,如网易.新浪.搜狐. 邮箱密码使用大小写字母.数字和符号组合起来设置,这样更安全. 古时候通信有烽火台.驿站. 注册电子邮箱: 登陆126或其他邮箱网站. 单击"立即注册&q ...
  • 新创公司该如何以小博大.以弱胜强?听周鸿祎为你解读[柔道战略]
    书名:柔道战略 作者:Yolfie 译者:傅燕凌 孙海龙 出版社:机械工业出版社 出版时间:2003-01-01 中国互联网巨头本身创新能力不够,就会反过来模仿小公司.压制创新,创业公司的空间会越来越小.所以今天的创业者急需柔道思维 &qu ...
  • 突发事件中的微博传播与舆论引导
    北方民族大学 学士学位论文 论文题目: 突发事件中的微博传播与舆论引导 院(部)名 称: 文史学院 . 学 生 姓 名: 秦烈宁 . 专 业: 新闻学 学 号: 20081484. 指导教师姓名: 周红 . 论文提交时间: 2012-4-1 ...
  • 磺胺醋酰钠的合成
    磺胺醋酰钠的合成 一. 药品概述. 别名:磺胺乙酰钠,磺醋酰胺钠,Sulphacetamide Sodium,Albucid Soluble ,SA-Na 等.本品为白色结晶性粉末:无臭,味微苦.本品在水中易溶,在乙醇中略溶.磺胺醋酰钠在临 ...
  • 高中数学精选题(191)充分条件与必要条件
    搜狐教育 > 高考 > 高考试题点评 高中数学精选题(191)充分条件与必要条件 Math173 2016-03-30 08:47:51 高考试题点评 阅读(90) 评论(0) 声明:本文由入驻搜狐公众平台的作者撰写,除搜狐官方 ...
  • 网络基础知识及常用软件 - 系统攻防 - 360论坛
    [好学者] 系统攻防版主 金币:1537 经验:8939 等级:高中二年级 功勋:14 短信 [回到顶部][奖励金币][回复此楼][引用][举报] 1 楼 2011-04-16 08:56 [心得] 网络基础知识及常用软件 一.网络基础知识 ...

热门内容