・实验技术・
高效液相色谱仪测定酱油中
苯甲酸的不确定度
戚荣平
中图分类号:R65717+2 文献标识码:B 文章编号:100720931(2006) 0120081202
国家技术监督局发布的“测量不确定度评定和表示”, 以高效液相色谱法测定酱油中苯甲酸为例, 分析了利用标准曲线测定样品的不确定度计算和步骤, 在实际工作中有
2]较强的实用价值[1、。
表1 标准曲线数据(每个浓度测定3次)
标准液浓度x (ng/μl )
1
1010
2010
3010
5010
[***********][***********][***********][***********]93606118
1 检测方法 采用G B/T5009. 29-2003方法, 标准使用
峰面积2液浓度为01050mg/ml 。酱油样品用超纯水定容后, 经
μm 水系滤膜过滤后进行测定。手动进样器吸取标准使0145
用液20ul 注入进样口, 将不同浓度的4复3次进行标样分析, 得出标准曲线, 的峰面积测定相应浓度。
2 测量数学模型211 计算公式:y =1。
12285736, a =611153546, r =0199997; 即:y =7212285736x +611153546。
212 酱油样品测定6次, 结果见表2。
表2 酱油样品测定(n =6) 结果
峰面积y 样品浓度x (ng/μl )
[***********]
[***********]
[***********]
[***********]
[***********]
[***********]
得出Y ′=2917142499 x ′=40130690(ng/μl )
6(xi -) 2=0102744
(n -1)
3 测定酱油中苯甲酸浓度的不确定度分量
x ′=
311 A 类不确定度, 即重复测定样品产生的相对不确定度u rel (1) ==6181×10-4
(x ′)
312 工作曲线拟合引起的相对不确定度u rel (2) , 工作曲线
浓度x
(ng/μl ) [1**********]0
n i =1
表3 工作曲线数据
代入工作曲线计算得出的峰面积
[***********][***********][***********][***********]543617154
峰面积
y [***********][***********][***********][***********]183600149
[y -(bx
+a ) ][***********][***********][***********][1**********]0
见表3。
得x =2715(ng/μl ) 6[y i -u rel (2) 计算公式表示为:u rel (2) =
xb
(b j +a ) ]2=1501192
[1**********]0
2
=3164×10-++
P n S xx
(bx i +a ) ]2n -3
=12192
3
S =
n
[y i -
S xx =6(x j -x ) 2=2625
i =1
注:n —标准溶液测定次数, n =4×3=12; p —测试样品得次数, p =6; x —各个标准溶液浓度的平均值, x =2715(ng/μl ) ;
x ′—样品浓度的平均值, x ′=40130690(ng/μl ) ; b —工作曲线的斜
率, b =7212285736; j —下标, 测试标准溶液的次数。
作者单位:杭州市下城区疾病预防控制中心, 浙江杭州 310003
313 苯甲酸标准溶液以及配制引起的相对不确定度u rel (3) ,
苯甲酸标准溶液的配制(以0105mg/ml 标准溶液为例) :用
10ml 移液管吸取10ml 苯甲酸标准贮备液(1100mg/ml ) ,
体积不确定度为(实际温差为3℃, 水的体积膨胀系数为
211×10-4/℃,
-4=010364ml
以上三项合成得出:
222
=01068×10-V 2
综上所述, u rel (v3) =
2
由国家标准物质研究中心提供, 编号为G BW (E ) 100006, 相对不确定度为1%) 至100ml 容量瓶中, 定容到刻度, 得浓度为011mg/ml 标准使用液, 再用5ml 刻度吸管吸取5ml 标准使用液至100ml 容量瓶中, 定容到刻度, 得浓度为0105mg/ml (50ng/μl ) 标准使用液。公式表示为:
C 1=C 0V 2V 4
注:C 1—苯甲酸标准使用液的浓度; C 0—苯甲酸标准贮备液的浓度; V 1—10ml 移液管的体积; V 2—100ml 容量瓶的体积; V 3—
5ml 刻度吸管吸取5ml 标准使用液; V 4—100ml 容量瓶的体积。
u rel (v2) =
-2222
102rel (c ) +u rel (v ) +u rel (v ) +u rel (v ) +u rel (v ) =0152×01234
2
314 峰面积的量化误差相对不确定U rel (4)
本中心高效液相色谱仪的峰面积最小分辨率为0100001
=110×10-9(忽略不计)
2×y ′
315 分析仪器的相对不确定度u rel (5)
u rel (v4) =
31311 苯甲酸标准贮备液的相对不确定度u rel (c0) , 已知苯
甲酸标准贮备液1100mg/ml , 相对不确定度为1%, k =2, 则u rel (c0) =
=015%2
31312 移液管(10ml ) 的相对不确定度u rel (vl ) , 其中又包
(1) 吸管体积的不确定度, 称液管(10ml ) (2) 吸取时的估读误差, 估计为 01005ml (以RSD 表示) 为0122%() , 则
4 综上所述, 酱油中苯
(5) =
括三个部分:
的容量允差为±0102ml , 按均匀分布换算成标准差为
=010116ml ;
4。
=013按均匀分布换算成标准差为
表4 酱油中苯甲酸含量不确定度来源
序号
来源
12345
相对不确定度
符合
u rel (1) u rel (2) u rel (3) u rel (4) u rel (5)
自由度
数值
6181×10-43164×100152×10110×10910×10
-3-2
(实际温差为3℃, 211×10-4/℃) 。u rel =
-4010036ml
以上三项合成得出:
符合数值
v 1v 2v 3v 4v 5
59505050
222
=01125×10-2
V 1
31313 刻度吸管(5ml ) 吸取5ml 标准使用液的相对不确u rel (vl ) =
重复性
工作曲线标准溶液量化误差分析仪器
-9-4
定度u rel (v3) :其中又包括三个部分:第一, 刻度吸管体积的不确定度, 刻度吸管(5ml ) 的容量允差为±01025ml , 按均
=010144ml ; 第二, 吸取时的估读误差, 估计为±01005ml , 按均匀分布换算成标准偏
5 合成标准不确定度
u c ,rel =10-2
2222
2rel (1) +u rel (2) +u rel (3) +u rel (4) +u rel (5) =0164×
匀分布换算成标准偏差为
=010029ml ; 第三, 移液管和溶液的温度与校正时的温度不同引起的体积不确定度为(实际温差为3℃, 水
差为
46 有效自由度 v eff =4=504
44+++595050
7 扩展不确定度分析 取可信区间95%, 查t 表得t 9550=
) , 的体积膨胀系数为211×10-4/℃
010018ml
-4
2101, 合成标准不确定度u c =u c ,rel ×x ′=0164×10-2×40130690=0126(ng/μl ) , 扩展不确定度U =u c ×t 9550=0152(ng/μl ) 。8 结果报告 测定结果:(40130690±0152) ng/μl , k =2, p =95%
=
以上三项合成得出:
222
u rel (v3) ==01043×10-2
V 3
31314 容量瓶(100ml ) 的相对不确定度u rel (v2) , u rel (v4) :
参考文献
[1]国家技术监督局. 测量不确定度评定和表示[S].中华人民共
同理, 其中又包括三个部分:第一, 容量瓶体积的不确定度, 容量瓶(100ml ) 的容量允差为±0110ml , 按均匀分布
=01277ml ; 第二, 定容时的估读误差, 估计为±01005ml , 按均匀分布换算成标准偏差为
和国国家计量技术规范JJ F1059—1999.
[2]中国实验室国家认可委员会. 化学分析中不确定度的评估指南
[M ].北京:中国计量出版社. 2002.
(收稿日期:2005201204)
换算成标准偏差为
=01029ml ; 第三, 容量瓶和溶液的温度不同引起的国内统一刊号:CN33-1200/R 定价:4100元