摘要：通过平板培养、毒力测定和孢子计数的方法，研究了精喹禾灵、苯磺隆、百草枯、农基阔锄等常见除草剂对木霉菌落生长和产孢量的影响。结果表明，精喹禾灵的毒性最高，田间施用剂量下的抑菌率为７８．０３％，产孢抑制菌为９３．４1％；苯磺隆、农基阔锄、百草枯田间施用量剂量下的抑菌率分别为４．９３％、２７．３２％、１１．２７％，产孢抑制率分别为１８．６8％、４１．20％、２５．27％。在施用木霉做生防菌时，可适当考虑用苯磺隆或百草枯去除杂草。 关键词：木霉；除草剂；生物防治；毒力测定 中图分类号：Ｓ４８２．４文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）10－2005-03 Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Sｅｖｅｒａｌ Cｏｍｍｏｎ Hｅｒｂｉｃｉｄｅｓ ｏｎ ｔｈｅ Gｒｏｗｔｈ ａｎｄ Sｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ Qｕａｎｔｉｔｙ ｏｆ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ ＣＨＥＮＧ Ｙｕａｎ－ｇａｎｇ，ＺＨＯＵ Ｘｉｕ－ｒｅｎ，ＪＩＡＮ Ｚａｉ－ｙｏｕ，ＭＥＮＧ Ｌｉ （Cｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｌａｎｄｓｃａｐｅ Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ， Ｈｅｎａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉｎｘｉａｎｇ ４５３００３，Ｈｅｎａｎ，Ｃhｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： The ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｏｍｍｏｎ ｈｅｒｂｉｃｉｄｅｓ， ｓｕｃｈ ａｓ Quizalofop-p-ethyl， Ｔｒｉｂｅｎｕｒｏｎ－ｍｅｔｈｌｙ， Ｐａｒａｑｕａｔ， Ｆｌｕｏｒｏｇｌｙｃｏｆｅｎ－ｅｔｈｙｌ ｅｍｕｌｓｉｆｉａｂｌｅ ｅｔｃ.， ｏｎ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ harzianum ｃｏｌｏｎｙ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ ｑｕａｎｔｉｔｙ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆｐｌａｔｅ ｃｕｌｔｕｒｅ， ｓｐｏｒｅ ｃｏｕｎｔ ａｎｄ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｔｅｓｔ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｏｆ Qｕｉｚａｌｏｆｏｐ－ｐ－ｅｔｈｙｌ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ， ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｒａｔｅ ｏｆ ｆｉｅｌｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ ｗａｓ ７８．０３％ ａｎｄ ９３．４１％ respectively． Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｒａｔｅ ｏｆ ｆｉｅｌｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ of Ｔｒｉｂｅｎｕｒｏｎ－ｍｅｔｈｙｌ， Ｐａｒａｑｕａｔ ａｎｄ Ｆｌｕｏｒｏｇｌｙｃｏｆｅｎ－ｅｔｈｙｌ ｅｍｕｌｓｉｆｉａｂｌｅ ｗａｓ ４．９３％， ２７．３２％ ａｎｄ １１．２７％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ， ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｒａｔｅ ｏｆ ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ ｗａｓ １８．６８％， ４１．２０％ ａｎｄ ２５．２７％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｗｈｅｎ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ harzianum ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ｂｉｏ－ｃｏｎｔｒｏｌ ａｇｅｎｔ， Ｔｒｉｂｅｎｕｒｏｎ－ｍｅｔｈｌｙ ｏｒ Ｆｌｕｏｒｏｇｌｙｃｏｆｅｎ－ｅｔｈｙｌ ｅｍｕｌｓｉｆｉａｂｌｅ ｓｈｏｕｌｄ ｂｅ ｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄ ｔｏ ｂｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｉｎ ｒｅｍｏｖｉｎｇ ｗｅｅｄｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｈａｒｚｉａｎｕｍ； ｈｅｒｂｉｃｉｄｅ； ｂｉｏ－ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ； ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ 化学防治目前仍然是植物病虫害防治的主要手段，然而其易导致环境污染，病原物也易对其产生耐药或抗药性，在植物病虫害防治中人们已经探索出利用生物防治的方法来替代化学杀虫剂或杀菌剂。木霉菌（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）是目前使用最多的植物病害生防菌，它具有广谱的生防效果，还具有促进植物发芽、生长、开花的作用［１－３］。同时由于木霉无污染、无残留、用于作物土传病害的生物防治风险极小，因此在许多园艺作物和大田作物土壤病害的防治上都有使用［４］。在农业生产中，作物会同时受到病原菌、杂草和害虫等不同种类的有害生物的伤害，因此田间喷施其他防治药剂时，可能会对生防菌的生长和繁殖产生影响。 目前常用的生防菌主要有木霉、白僵菌、绿僵菌和虫霉等，已有的研究结果表明，某些杀菌剂、杀虫剂和除草剂在室内条件下能强烈抑制真菌的孢子萌发，可造成害虫、病原真菌在田间的发生与流行［５］。木霉的生防机制，主要包括竞争、重寄生、抗生、溶菌等。由于木霉的生防机制复杂，在进行生防时要避免使用对木霉有害的化学物质。目前国内在杀菌剂、杀虫剂、除草剂等化学农药与一些生防菌，如绿色木霉、盾壳霉等的相互作用方面有一些研究报道，这些研究对农业生产实践产生了一定的指导作用。本试验在实验室研究了大田常用的几种除草剂在田间施用量下对木霉菌丝生长和产孢子量的影响，以期为木霉作为对粮食和园艺作物病害的生物防治农药时，田间除草剂的施用提供技术和实践上的参考。 １试验材料 供试菌株由河南科技学院植物学实验室分离得到，经形态和分子生物学鉴定为绿色木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｖｉｒｉｄｅ）；除草剂为市售常用的２０％百草枯水剂（郑州大河农化有限公司）、５０％草甘膦可溶性粉剂（浚县正午阳光化工有限公司）、１０％苯磺隆可湿性粉剂和5%精喹禾灵乳油（安徽金泰农药化工有限公司）、农基阔锄（淄博新农基农药化工有限公司，１０％乙羧氟草醚乳油）、１３％ ２甲４氯钠盐（重庆树荣化工有限公司），对照用５０％多菌灵可湿性粉剂（西安喷得绿农化有限公司）。 ２试验设计 ２．１除草剂对木霉的影响 按照各除草剂使用说明书中的田间施用量为中间浓度配制成５个梯度的含药培养基，同时设置以不含农药的ＰＤＡ培养基CK1和含１ ０００ ｍｇ／Ｌ的多菌灵的PDA培养基CK2为对照。倒平板前用灭菌的过滤器过滤除草剂溶液，待灭菌好的ＰＤＡ培养基冷却到５０～７０℃时按１∶５０（除草剂溶液∶PDA培养基）的量加入除草剂溶液混匀后倒平板，每组设置３个重复，每种除草剂具体含量见表１。采用含毒介质培养法，将活化好的平板菌种用打孔器切取直径为５ ｍｍ大小的菌块并放置于平板正中央。于恒温培养箱中２５ ℃培养７２ ｈ。采用十字交叉法测量菌落直径。计算抑菌率。 抑菌率＝（CK1菌落直径－处理菌落直径）／CK1菌落直径×１００％。 继续培养至96 ｈ，测定产孢情况。孢子计数用血球板镜检计数法［６］。计算产孢抑制率。 产孢抑制率=（CK1产孢量-处理产孢量）/CK1产孢量×100% ２．２室内除草剂毒力测定 根据预试验结果用ＥＸＣEＬ２００３求出除草剂的毒力回归曲线，以毒力回归曲线算出ＥＣ５０的浓度和不同除草剂在田间施用量下对木霉的抑菌率。 ３结果与分析 ３．１不同除草剂对木霉生长量的影响 培养７２ｈ的菌落生长直径、抑菌率情况见表２。多菌灵和不含农药的ＰＤＡ对照菌落直径分别为３．１６ ｃｍ和７．１０ ｃｍ，在田间施用量下精喹禾灵、草甘膦、２甲４氯钠盐的抑菌率都较大，分别为７８．０３％、６１．７９％、６０．５６％。精喹禾灵的毒性最高，ＥＣ５０为０．５１２ ｍｇ／Ｌ（表3），浓度大于５．２0 ｍｇ／Ｌ时，木霉菌停止生长。农基阔锄、百草枯的抑制作用较弱，在田间施用量时的抑菌率为２７．３２％、１１．２７％，比多菌灵的抑菌率５５．４９％要低。当百草枯浓度增大时，抑菌率迅速上升，当浓度达到２ ５６０ ｍｇ／Ｌ时，菌落直径只有１．０５ cm，抑菌率达到８５．２1％，因此在实际使用中，随意加大除草剂百草枯的施用浓度会对木霉造成较大不利影响。苯磺隆的抑菌率最小，ＥＣ５０为
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１３ ５５６．３４２ ｍｇ／Ｌ，田间施用量下抑菌率只有４．９4％，浓度为田间施用量的４倍时抑菌率为９．４4％，说明苯磺隆对木霉的毒性较小。 ３．２不同除草剂对木霉产孢量的影响 菌落培养到96 h，添加苯磺隆、百草枯、农基阔锄的培养基都产生出大量的孢子（图１）。添加精喹禾灵、草甘膦、２甲４氯钠盐的培养基长出的菌落较小，产生的孢子量很少。苯磺隆、百草枯、农基阔锄的产孢抑制率分别为１８．６8％、２５．27％、４１．20％。精喹禾灵、草甘膦、２甲４氯钠盐的产孢抑制率大于８０％（表４）。 ４讨论与分析 目前，农业生产上草害防除的主要方式为化学除草，化学除草剂的种类越来越多，应用领域和范围越来越广。由于化学除草剂通常残效期较长，会影响有益微生物的生长和繁殖［７］。本次试验的研究结果表明，部分除草剂对木霉产生显著的影响，供试的除草剂品种中，精喹禾灵对木霉的生长影响最为显著，毒力也最大，农基阔除的影响也比较大。就本次试验结果来看，苯磺隆比较适合与木霉同时施用或复合使用，而在使用精喹禾灵的情况下要尽量避免施药前或在施药后短期内使用木霉。 郎剑锋等［８］的研究显示，除草剂中对木霉生长和产孢子量影响最大的是农基阔锄，田间浓度抑菌率为５２．５％。程东美等［１］研究所选除草剂对哈茨木霉的影响结果是苄・甲磺隆对菌丝的抑菌率最大，抑菌率达到９２．６％。在本试验中，苯磺隆的毒力是所选除草剂中毒力最小的，从苯磺隆与苄・甲磺隆的分子结构和药效成分上看，苯磺隆可由甲磺隆甲基化而得，具有相同的母核，但是对木霉的毒力相去甚远。这很可能是由于苄・甲磺隆是一种含苄嘧磺隆、甲磺隆、乙草胺的复合除草剂，其中所含乙草胺对微生物的毒性比较大。 结合前人和本试验的研究分析结果表明，不同类型除草剂对木霉的影响差异较大，因此有必要对除草剂的毒力做全面综合的试验，以便为农业生产中木霉菌的生防应用提供参考。 试验仅仅室内测定了几种供试除草剂对木霉生长的影响以及毒力，而大田条件下不同木霉菌株受不同除草剂影响的情况有待进一步的研究。 参考文献： ［１］ 程东美，李松涛，张志祥，等． 常用土壤处理除草剂对哈茨木霉的影响［Ｊ］． 江苏农业学报， ２００９，２５（１）：２１６－２１８． ［２］ 刘云龙，何永宏，张旭东． 哈茨木霉对辣椒生长的影响［Ｊ］．云南农业大学学报，２００２，１７（４）： ３４５－３４６． ［３］ 张旭东，刘云龙，张中义． 木霉生防菌对植物生长的影响［Ｊ］． 云南农业大学学报，２００１，１６（４）： ２９９－３０３． ［４］ 庄敬华，陈捷，杨长成，等． 生防木霉菌生物安全性评价［Ｊ］． 中国农业科学，２００６，３９（４）：７１５－７２０． ［５］ 王允东，唐钰朋． 木霉菌对植物病原真菌的拮抗机制［Ｊ］． 安徽农学通报，２００８，１４（９）：１７６－１７７． ［６］ 陈小均，燕嗣皇，吴石平． 氮磷钾肥对木霉菌丝生长和产孢的影响［Ｊ］． 贵州农业科学，２００５，３３（２）：３４－３５． ［７］ 王勇，王万立，刘春艳， 等． 生防木霉菌 Ｔｒ９７０１的鉴定及其生物学特性［Ｊ］． 华北农学报， ２００６，２１（１）：１００－１０４． ［８］ 郎剑锋，赵荣艳，吴艳兵，等． 常用除草剂对木霉菌丝生长和产孢量的影响［Ｊ］． 广东农业科学，２０１０（５）：１０１－１０２． 注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文
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