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透析袋实验前处理

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①把透析袋剪成适当长度(10cm左右)的小段。

②取适量透析袋处理液(Fast-Tre Solution)稀释100倍,将透析袋放于其中煮沸10分钟。

③取出用蒸馏水彻底清洗透析袋。

④ 暂不使用的话需要将透析袋完全浸泡到稀释100倍后的透析袋储存液(Long-Sav Solution)中,存放于4度。从此时起取用透析袋是必须戴手套。

⑤浸泡在透析袋储存液中的透析袋取出使用前,须将透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净,冲洗三次即可。

实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮10min即可使用

⑥使用时,一端用下沉透析袋夹子夹紧,灌满水后,用手指适当加压,检查不漏,方可装入样品。通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。装完样品后,用上浮夹子夹紧袋口,可在袋内放一玻璃珠,以使透析袋处于悬浮状态,即可进行透析(详见下页透析袋装置简图)。为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁力搅拌器。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。

+

①PH稳定范围:5-9;②污染物水平:硫化物<0.3%,重金属<50ppm;③化学兼容性:与很多盐兼容,比如CaC12,(NH4)2SO4;还可与分子生物学及酶学中常用的水溶剂、有机溶剂兼容,如异丙醇、乙醇和丙酮;④温度抵抗性:可煮沸,可高压灭菌;⑤蛋白吸附:每克透析袋吸附蛋白量<1ng。

处理方法:

1.将透析管剪成适当长度(10-20cm)的小段,即成透析袋。

2.在大体积的2%(m/v)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH=8)中将透析袋煮沸10min。

3.将透析袋用蒸馏水彻底漂洗。

4.将透析袋置1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min。

5.透析袋冷却后存放于4度,应确保透析袋始终浸没在液体中。注:从此步起用透析袋时一定要戴手套操作。

6.在使用之前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。

注:也可以将透析袋放在广口瓶中充满水,松动瓶盖,于20psi(1.40kg/cm2)高压灭菌10min,代替第四步用1mmol/LEDTA(PH=8)中煮沸10min的操作。

实验要求不高的可以用简易处理方法:在沸水中煮10min即可使用

使用前处理:

1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。

2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透

析袋煮沸10分钟。

3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。

4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。

5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此

时起取用透析袋是必须戴手套。

6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。

说明:

透析液的配置:10g NaHCO3 + 186.6mg EDTA.2Na + 500mL蒸馏水

1 mmol/L EDTA.2Na:即373.2mg/L

说明:

1.

EDTA煮主要是为了除去生产时附着在透析袋上的金属离子。 使用后的透析袋保存方法:

1.用生理盐水浸泡以去掉蛋白,并用蒸馏水清洗干净,然后置于50%乙醇中保存即可;

2.用完以后,要彻底洗干净,透析袋也可以保存在0.1%叠氮钠(可防止微生物生长)里;0.05%-0.1%叠氮钠,或者1mM EDTA,或者50%甘油中4度保存,公司的人建议前两种保存比较好!

3.使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水或者30%乙醇中,确保透析袋始终浸没在溶液内。若长时间不用,可加少量NaN2,以防长菌。从此时起取用透析袋必须戴手套。洗净凉干的透析袋弯折时易裂口,用时必须仔细检查,不漏时方可重复使用。


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