1. 血液生化指标检测:
采用强 生 快 速 血 糖 仪 测 定FBG;TC、TG、HDL-C、LDL-C采用奥林巴斯AU400全自动生化分析仪测定,试剂购于北京中生生物工程高技术公司。胰岛素测量采用增强化学发光免疫分析法检测FIns,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)采用HOMA稳态模型计算,即HOMA-IR=FBG×FIns/22.5。
2. 基因型检测是由上海天昊生物科技有限公司采用iMLDR 技术进行分型,该技术是基于传统的连接酶反应经过改进后的多重SNP 分型技术。
1) 目标位点所在区段先采用多重PCR 反应在一个体系中获得扩增。
2) 扩增产物经外切核酸酶及虾碱酶(ExoI/SAP)纯化后用于后续连接酶反应的模板。
3) 在一个连接反应中,每个位点包含两个5’端等位基因特异探针(其3’末端分别为两个等位基因特异碱基或序列---对插入缺失多态而言)以及紧挨其后的一条3’端位点的荧光标记的特异探针。连接产物通过ABI3730XL 的毛细管电泳来区分,原始数据文件用GeneMapper4.1软件(Appliedbiosystems )来分析。
2 (X ±s )