血凝试验检查的影响因素分析
1 血样的采集与处理 11 采血技术 患者应处于平静状态、空腹；采血前不应拍打采血部位，必须顺利“一针见血”，避免混入组织液或发生溶血；压脉带不应扎的太紧，压迫时间不应过长；采血速度要适当，建议使用定量真空采血管；采血后要立即与抗凝剂混合，但不要用力震荡。采血顺序对试验结果也有影响，朱忠勇报道［1］：PT 血样采集顺序第二管、第三管与第一管比较差异有统计学意义，APTT 的差异则无统计学意义。 12 标本运输、保存与处理 标本应随采随检，如需运输标本应在室温下运送，低温会破坏血小板活化因子导致PT 、APTT 结果降低。血浆标本原则上应立即检测，血液一旦离体即开始变化，随离体时间的延长凝血因子逐渐消耗，从而检测出的结果也不同。分离血浆置室温2 h所测结果与立即测定PT 、APTT 结果有明显差异(P＜001) ［2］。凝血试验应在室温保存4 h内完成，如不能完成应4℃保存，24 h内完成。20℃保存的标本应1周内完成检测，否则会对结果产生影响［3］。血液离心是凝血试验标本处理的关键步骤，离心的目的就是尽可能地除去血浆中的血小板，以便排除血小板数量和功能对试验的影响。有报道认为标本离心的相对离心力RCF≥2000 g，离心时间不少于15 min为宜［4］。 13 抗凝剂的选择 抗凝剂的选择对血凝检测结果起着重要作用，根据ICSH 及ICTH 推荐的0019 mol/L枸橼酸钠是凝血因子检测的首选抗凝剂。因枸橼酸钠对Ⅴ、Ⅷ因子有一定的保护作用，不受肝素影响，还适用于接受肝素治疗患者的监测。而草酸盐能与钙离子形成不溶性沉淀物，影响血凝仪的光电终点。肝素可与AT Ⅲ作用抑制凝血因子的反应。EDTA 能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成纤维蛋白原单体聚合，且对V 因子保护性差。
血液与抗凝剂的比例应按9∶ 1比例混合，9份血液指9份红细胞压积正常血液中血浆的量，抗凝剂只对血浆起作用，如抗凝剂加入不准确会影响血凝结果。另外，由于贫血或红细胞增多症影响血浆量的变化而引起抗凝剂在血浆中绝对含量改变，也会影响试验结果。因此在日常工作中要注意红细胞压积的变化，当HCT 超出或低于正常范围时，应用计算公式随时调整抗凝剂的用量，以保证抗凝剂在血浆中的绝对值含量不变［5］。
2 试剂 21 试剂的选择 试剂的质量是确保结果可靠性的先决条件，试剂的选择一方面要根据所用检测仪器的类型，另一方面要根据试验检测目的选择对其敏感的试剂。为了试验结果便于比较和估计抗凝剂疗效或指导用药，最好选择INR 报告方式。因此，选择试剂应标有ISI 值，理论上ISI 值越接近10越好，ISI 值的高低决定INR 的精度，也决定试剂的质量［6］。 22 试剂的使用及保存 221 试剂在使用时应严格按说明书操作。试剂复溶剂一般为蒸馏水、注射用水或pH 6
0~70去离子水。复溶剂pH 值增高会使凝血时间延长；若水质浑浊污染或钙离子存在，或含有保护剂抗生素抗体或其他添加剂的水，不能用于试剂的复溶剂。复溶后的试剂不能反复冻融，不用时应加盖并保存在2~8℃，所有试剂均应在有效期内使用。 222 试剂使用时要注意污染的问题，避免试剂瓶盖盖错，造成交叉污染。