第32卷第3期
2008年5月
水生生物学报
ACTAHYDROBIOLOGICASINICA
Vol.32,No.3May,200 8
南方鲇中肾的发生及肾单位的发育岳兴建1,2 张耀光1 谢碧文1,2 王志坚1
(11西南大学,三峡库区生态环境教育部重点实验室,水产科学重庆市市级重点实验室,重庆 400715;
21内江师范学院化学与生命科学系,内江 641112)
摘要:应用组织学、组织化学技术对南方鲇(SilurusmeridionalisChen)。结果表明:中肾的发生始于出膜后24h,其发生、、、肾小体发生、初级肾单位形成、初级肾单位成熟及第二、,第一代中肾单位才开始行使功能。19d至3、分化期、发育期、成熟期4个时期。幼鱼PI,血管球有较大的通透性所致,3。关键词:;;;4 :A 文章编号:100023207(2008)0320365208
有关硬骨鱼类中肾发生的形态学研究,仅见少
量文献[1,2]。国外学者将细点牙鲷(Dentexdentex)中肾的发生简单分为4个阶段[2];国内学者在青鱼(Mylopharyngodonpiceus)、泥鳅(Misguruusanguilli2caudatus)器官的早期发生中述及了相关组织的位置,但没有对中肾发生的描述[3,4]。对众多鱼类来说,肾发生、发育的研究尚缺乏较系统的资料。本文通过对南方鲇中肾发生、中肾肾单位发育过程的研究,探讨鱼类器官发生、发育的一般规律,为鱼类发育生物学积累组织形态学基础资料。
),从原肠期开始进行连续化(孵化温度(21±015)℃
观察、取材。原肠期到胚胎孵化期每3h取材1次,出现明显外形变化时增加取材1次,出膜后6h、12h、18h、24h、48h、62h各取材1次,第3至第13天每天
取材1次,以后于第16、第19、第22、第26、第30、第34、第45、第56、第70、第90天各取材1次,幼鱼到
亚成体肾的发育,取2、3、6月龄,1龄、2龄鱼肾组织。胚胎材料每期收集30—50个,仔鱼材料15—20个,较大个体材料5—8个。出膜前和孵化后卵黄囊期仔鱼用Smithπs液固定16h,换水法洗16h去固定液,其间换水多次。卵黄囊消失以后个体材料用Bounπs液或Carnoyπs液固定。材料经30%、50%酒精
1 材料与方法
111 材料 2001年3—4月在嘉陵江北碚2合川段
脱水15—20min,保存在70%酒精中。较大幼鱼去头、尾,再大个体则取出肾于Bounπs液或Carnoyπs液固定。常规石蜡包埋,切片时进行横、纵、矢状连续
μ切片,胚胎及幼鱼材料切片厚度5—7m,苏木精2伊红(HE)染色或者过碘酸2Schiffπs液2苏木精(PAS2H)染色。Nikon研究用显微镜观察、照相。
胚胎及幼鱼发育的时期划分按谢小军标准[5,6]。从出膜到3月龄,分别以鸡蛋黄、水蚯蚓、
饵料鱼饲养,用加热管、加热线圈维持水温度(21±015)℃。中肾肾单位发育的分期参考软骨鱼类中肾
收集南方鲇(SilurusmeridionalisChen)亲鱼2对,人工催产授精,所得受精卵经人工控温孵化。胚胎、幼鱼材料直接用于肾组织发生、发育观察;1—6月龄、
1龄、2龄鱼取材用于幼鱼肾的形态、发育的观察。6月龄、1龄、2龄鱼从嘉陵江网箱养殖船上购买。6月龄鱼4尾,体长232—263mm,体重100—145g;1龄鱼4尾,体长465—480mm,体重1200—1300g;2龄鱼4尾,体长530—600mm,体重1200—2100g。112 方法 人工授精所得受精卵于室内水池中孵
收稿日期:2007205210;修订日期:2007209214
基金项目:水产科学重庆市市级重点实验室基金项目(2000206)资助
),男,四川峨眉人;博士研究生,讲师;主要从事动物形态与发育研究。E2mail:silurus@sohu.com作者简介:岳兴建(1970—
通讯作者:张耀光,E2mail:zhangyg@swu.edu.cn
366 水 生 生 物 学 报32卷
单位发育及人类、爬行类胚胎后肾单位发育的标准[7—9],根据肾小管细胞形态、染色反应、细胞高度、肾小球毛细血管的发达程度及肾小囊形态大小等对中肾单位的发生分期。
肾小管末端有嗜碱性细胞聚集,形成内生细胞团,为肾小体发生的原始阶段(图版Ⅰ27,PRC)。出膜7d,体长1412mm。新生血管球细胞团分化出少量毛细血管。肾小囊脏层、壁层细胞均为立方形。
出膜8d,体长1514mm。第12肌节之后,次级中肾管已经多处与直管状wolffπs管贯通,wolffπs管已与中肾系统连通可称为“中肾管”。中肾管壁细胞胞质略呈嗜酸性。在12—17肌节,中肾小球、,1(181,核仁一个,明
,(图版Ⅰ28,SND)。左右后主静,在中肾管内侧,向后延伸。左后主静脉在向后延伸的过程中逐渐消失,右后主静脉向后穿过中肾,在尾部形成尾静脉。
出膜10d,体长1619mm。肾小管上皮顶部出现PAS强阳性的刷状缘(图版Ⅰ29,箭头示),细胞质强嗜碱性。中肾中有大量生中肾细胞团、中肾小泡、肾小管芽、第一代肾单位形成,其间充满大量间充质细胞。
初级肾单位的成熟及第二、三级肾单位发生 出膜16d,体长2514mm。中肾管与前肾仍然相连,管壁细胞PAS阳性。鳔背后的肾索位置只有淋巴样细胞存在。随着鳔的增长及向后延伸,其背部的中肾组织逐渐退化形成肾索,但其中尚有蟠曲的中肾管存在。鳔后部的肾组织发育受阻,其两侧肾组织发育,从而形成
μ成体肾的前部。次级中肾管直径3010—3316m,细胞
μμ略微立方形,约1210m×1018m(图版Ⅰ210,SND)。次级中肾管上,开始诱导产生中肾单位,这就是第二级中肾
单位的发生。此时初级肾单位尚未完全成熟,毛细血
μ管球较大,肾小体直径8410m,肾小管顶部PAS阳性,
未完全分化(图版Ⅰ210)。
出膜19d,体长28154mm。中肾单位已经分化出肾小管各段,其第一近端小管细胞顶部出现强烈PAS阳性刷状缘,细胞质中出现PAS阳性且嗜伊红大型颗粒(图版Ⅰ211,箭头)。鳔背部连接前肾和中肾的中肾管已经完全退化,余下的中肾管细胞增高
μ到1618—1810m,核基位,细胞顶部PAS阳性(图版
)。Ⅰ212,箭头),管外有少许结缔组织(图版Ⅰ212,△次级中肾管顶部大多开始出现PAS阳性物,但少而
弱,管外尚无结缔组织存在。212 幼鱼中肾及中肾肾单位的发育
出膜19d至3月龄,体长2815—13810mm(2115—)。2715℃中肾行使泌尿功能,但肾单位尚未完全发育成熟,其组织内有较多的间充质细胞、发育各时期的中
2 结 果
211 中肾的发生与形成
间充质细胞增殖形成生中肾桥 出膜24h,体
长615mm,鳃血液循环期。9—17肌节之间为中肾发生区,背主动脉和wolffπs管之间,出现零星分布的间充质细胞,其胞核嗜碱性较强(图版Ⅰ21,MCC),来源不明。wolffπs管为直管,细胞矮柱状,(814—1210)μm×(418—61m,μ径约316—712m(图版Ⅰ21,W出膜48h,体长—,wolffπs
管背部,充质细胞更多、连接为带状形成生中肾桥(图版Ⅰ22,MNB)。6—10肌节处,wolffπs管由于增长而发生扭曲,切面上成泡状,其间有少量的间充质细胞侵入(图版Ⅰ23,WD),10—17肌节间wolffπs管为直管。出膜62h,体长910mm,15—17肌节生中肾桥细胞明显增多。
中肾小泡出现及肾小管芽形成 出膜4d,体长1112mm。11—17肌节处,增多的间充质细胞聚集于wolffπs管的背部。局部区域,有少数细胞在wolffπs管的诱导下,聚集为致密团状,形成中肾肾单位原基2生中肾细胞团(图版Ⅰ24,MNM)。切面上可见8—20个生中肾细胞聚集在一起,染色与其他间充质细胞一致,但胞间紧凑,胞体稍小,细胞质较少,强嗜碱性。一些细胞团中央出现空隙,形成中肾小泡,其细
μ胞柱状,高约1414m(图版Ⅰ25,MNV)。中肾小泡向
wolffπs管膨大,挤压,致使wolffπs管凹陷(图版Ⅰ24、5,WD)。出膜5d,体长1117mm。中肾小泡延长为管
状,形成肾小管芽。肾小管芽垂直于wolffπs管向背
μm,强嗜碱性部延伸,细胞高柱状,高约1410—1610
(图版Ⅰ26,RTB)肾小体发生及初级肾单位形成 出膜6d,体长1318mm。中肾在鳔后横切面积增大至(7210—8410)μm×(21810—24010)μm。其中央部分为右后主静脉,两侧为肾组织间充质细胞或中肾小泡、发生中的中肾管。整个中肾区域,除了wolffπs管之外,主要由强嗜碱性的间充质细胞、中肾小泡、肾小管芽组成。肾小管芽在组织中延长、扭曲,前段形成次级中肾管(图版Ⅰ27,SND),后段形成肾小管(图版Ⅰ27,RT)。
3期岳兴建等:南方鲇中肾的发生及肾单位的发育 367
肾单位,表现出与成鱼肾单位的明显差异。3月龄至2龄鱼中肾中仍然有大量处于各发育时期的中肾单位。21211 间充质细胞发育期 发育早期(图版Ⅱ216),肾小管进一步
分化,雏形已经形成,可以分辨出颈段、近端小管(P)、远端小管(DS)。肾小管各段细胞的顶部有不同程度的PAS阳性物出现,在P段尤为明显。各段肾小管聚集在发育中的肾小体周围,在肾小管之间有一些毛细血管形成,同时有一些淋巴细胞迁入形成肾管之间的拟淋巴组织。在P段,细胞高度增加明显,细胞呈柱状,,其中已经有一些PASPAS阳性较强,,细胞立。发育晚期(图版Ⅱ217),,各段肾小管直径均有明显的增大,细胞质增多,第一、第二近端小管(PI,PII)分化出来,各段可以区分。PI段,细胞高柱状,顶部刷状缘丰富,PAS强阳性,细胞质中有少量PAS阳性颗粒,并逐渐增多,胞质仍然弱嗜碱性。肾小管之间有较多的拟淋巴细胞迁入填充。肾小体(RC)血管球进一步增大,由成簇的毛细血管组成,毛细血管数量明显增多。肾小囊腔增大,壁层细胞和脏层细胞均扁平。以后肾小球进一步发育,血管球直径、肾小囊腔进一步增大。
成熟期 成熟期肾单位已具排泄功能,是幼体肾主要功能单位。但与成体还有重大差别,特点明
μ显:肾小体直径6110—7516m,鲍曼氏囊间隙916—
μ1516m。发育成熟的肾小球毛细血管明显,血管球发达。血管球中内皮细胞核苏木精染色较发育期的肾小球浅(图版Ⅱ218,RC)。NS细胞立方形,高
μm,细胞顶部有极少量PAS阳性物质。整418—610
μ个肾小体NS长约8410—9610m(图版Ⅱ218,19,
NS)。第一近端小管(PI)细胞高柱状,高1810—μμ2116m,宽约316—610m,切片上胞间界限不清楚。刷状缘嗜碱性、PAS强阳性。细胞顶部和成体一样的强PAS阳性带。细胞质中有大量较大的伊红深染、PAS强阳性颗粒,这是发育尚未完全的幼体中肾最大的特点(图版Ⅱ219、21,PI)。PII段细胞柱状,高
μμ1414—1516m,宽约418—610m,胞间界限清晰。μ核径316—412m,位于中部或偏基底部。细胞质中嗜伊红颗粒、PAS阳性颗粒少而小,细胞顶端具有嗜
伊红性强的PAS阳性刷状缘,但较PI段矮,也无顶部PAS阳性带(图版Ⅱ220、22、23,PII)。DS细胞立方
μ形,高712—916m,细胞质弱PAS阳性,细胞之间界限清晰;核居中;HE染色细胞质嗜酸性较强,染为均
匀明亮粉红色细小颗粒(图版Ⅱ223,DS)。集合管
μ细胞直径316—610m,核较大,占细胞体积绝
大部分,HE染为深蓝色。这些细胞和成鱼中肾中的淋巴髓样组织有较大区别,间充质细胞主要在肾组织边缘区域群集或分布于发生的肾单位之间,细胞团松散,在肾中部区域,聚集的间充质细胞较少(图版Ⅱ214、15,MCC),细胞群中缺乏血窦;处于生长发育的个体,肾边缘区域是一个组织增生区域;成鱼淋巴髓样组织细胞大小不一致,其中有丰富的血窦。21212 各发育期中肾肾单位幼鱼从中肾开始发生,,中肾肾单位不断发生,。
时期。,散布在中肾中的间充质细胞聚集为生中肾细胞团(图版Ⅱ213,MNM),随后其中出现空隙形成中肾小泡。各级中肾管诱导产生的中肾小泡延伸的方向均不确定,可向各个方向生长发育。中肾小泡延长为肾小管芽,其接近于中肾管一侧的细胞挤压中肾管,并与之贯通。肾小管芽在肾组织中分裂增殖,伸长,扭曲。前端接近中肾管的部分以后发育形成次一级的中肾管和各级收集管,后部盲端部分,随着细胞的增生而剧烈扭曲,将发育为肾单位的主要部分。
分化期 肾小管各段分化时期。肾小管常常扭曲为一团状结构,各部分排列紧密,其中没有或仅有少量其他填充细胞存在。较早时期,没有PAS阳性物(图版Ⅱ214)。稍后时期,在一些靠近肾小囊的肾小管中,细胞顶部出现PAS阳性物,近端小管部分开始分化出来,这是最早的肾小管的分化(图版Ⅱ215,P)。各段肾小管细胞矮柱状,细胞核强嗜碱性,细胞质略嗜碱性。肾小体尚处于原始状态,由原始的肾小囊及间充质细胞团组成。肾小囊呈杯状,由内外两层细胞构成,两层细胞之间的囊腔狭小。肾小囊脏层细胞立方形,排列紧密,壁层细胞立方形或矮柱状。肾小体尚未完全形成,血管球由向肾小囊腔内陷发生的未分化细胞团构成,细胞排列不规则,体积较大,胞间界限不清晰,血管球中无毛细血管,细胞强嗜碱性,胞核较大。早期肾小体细胞间缺乏PAS阳性物。后期细胞团增大,毛细血管开始形成,这些细胞开始形成基膜,有极弱的PAS阳性物存在,细胞嗜碱性较强(图版Ⅱ214、15,PRC)。
368 水 生 生 物 学 报32卷
(CS)细胞立方形,高418—μ610m,管径细小,PAS阳
性较远端小管稍强;细胞略嗜伊红,不如DS强,细胞形态完整(图版Ⅱ223,CS)。在以上各段肾小管中,上皮细胞都没有成鱼中肾小管所存在游走细胞,但在1—2龄较大个体中的成熟期中肾单位,则大量存在(图版Ⅱ225,DC)。收集管(CD)细胞为矮柱状,细
μμ胞高916—1312m,宽约418—712m。核圆形位于细胞基部或居中。细胞质嗜酸性。细胞顶部边缘,
HE染色显示嗜酸性较细胞质其他部分强(图版Ⅱ224,CD),PAS染色强阳性。管道外为厚度214—
μ4210m不等的结缔组织。
由wolffπs管诱导产生形成的次级中肾管,又诱导产生各级中肾管。一级中肾管之后,,越。体长9410mm时,
μ原wolffπs10810m。213 3月龄—2龄鱼中肾
全长1410mm时,肾小球才开始发生。出膜16d,体
长2514mm后,肾单位逐渐成熟。出膜19d,体长28154mm时,肾单位才出现幼鱼肾单位的特征,近端
小管细胞PAS强阳性,表现出与成体肾单位相似的较强重吸收功能[12],与细点牙鲷(Dentexdentex)发育的第3、4阶段时间相近[2]。
Newstead将生中肾桥出现作为中肾发生的开始[1]。πs管背部的间充质细胞增殖,wolffπs管的间充,[2]。叙述的以中肾桥出。根据普遍的关于鱼类、两栖类及羊膜类中肾原基来源的观点,它们是由体节处的生肾节发生而来的[10,11,13]。由于南方鲇幼体生长发育过程中的侧板中胚层部分很小,并且较早就分别与消化道、体壁融合,其生肾带并不明显,中肾并非直接由生肾带发育而来。但在中肾发育早期,观察到在wolffπs管背侧等部位有嗜碱性间充质细胞的存在,并逐渐增多,且散布在中肾发生部位即wolffπs管周围,不分节,并由此发育形成中肾。
312 南方鲇中肾肾单位发育的特点
随着幼体的发育,中肾逐渐增大,肾单位不断增
多。在生长发育的中肾组织中都有大量强烈嗜碱性的间充质细胞存在。3月龄,体长13810mm以后幼体,部分肾单位才开始出现和成体相同的细胞形态。6月龄至2龄鱼,体长23210mm以上,与成体形态一致
的肾单位逐渐占多数。但肾后部、边缘等区域,仍然可以见到一些聚集的间充质细胞。组织中往往也可以见到一些发育中的中肾单位。3月龄以后的成熟期肾单位上皮中,像成熟肾单位一样,除了NS以外,各段小管均有深染的游走细胞存在(图版Ⅱ225,DC)。
南方鲇中肾肾单位的发育显示出如下特点:
(1)第一代中肾小泡形成的细胞团,是由组织中的间充质细胞聚集而形成。它们并不分节排列,每个体节的生肾小泡形成的数目也为一到几个,发生的先后也不同,有的肾小体已经形成,次级中肾管已经开始诱导中肾小泡形成了,在wollfπs管周围还有大量的中肾小泡诱导产生。从位置上讲,中肾小泡随机地在组织中发生。(2)中肾肾单位发育的过程中,中肾小泡直接伸长形成直管道,不形成外小管,肾单位也不与体腔相通。而对于成体同是中肾的两栖类来说,在中肾肾单位发生的过程中,中肾小泡的腹面形成外小管,开口为肾孔,与体腔相通[13]。(3)中肾小泡直接延长形成肾小管芽,近中肾管部分与中肾管贯通。肾小管是由肾小管芽的后段部分发育而来,其盲端形成肾小体。两栖类则在中肾小泡的内侧形成内小管与中肾管相通[13]。(4)由组织中大量的间充质细胞聚集在各级中肾管周围,形成次级中肾小泡及以后的各级中肾小泡。在两栖类,则是通过内小管末端分出细胞团的方式形成各级中肾小泡[13]。(5)中肾小泡的发生方向不确定,可以在肾中向各个方向生长发育。所以成体中肾肾单位散布于肾组织
3 讨 论
311 中肾发生与中肾原基细胞的起源
在鱼类,有关中肾发育的资料实际上不多。中肾的发生较晚,通常在出膜以后,起源于来源不明的间充质细胞形成的生中肾桥,其细胞聚集形成柱状结构,衍生为中肾单位[1,2,10,11]。细点牙鲷(Dentex
dentex)中肾的发生被粗略地分为4个阶段:第一阶
段,出膜后2d,干细胞分布于前肾管之间;第二阶段,干细胞之间明显观察到动脉和静脉;第三阶段,出膜后17d,中肾单位出现,造血组织大量发生;第四阶段,出膜后24d,大量血管球形成[2]。
南方鲇中肾发育起始于出膜后24h,全长615mm时。此时仅有零星的间充质细胞形成,以后间充质细胞逐渐增多并形成生中肾小桥,直到出膜4d,全长1112mm左右时,形成中肾小泡。出膜7d,
3期岳兴建等:南方鲇中肾的发生及肾单位的发育 369
中。高等动物则不同,肾组织分区明显,中肾肾单位的发育有一定方向性和区域特性。(6)在肾小管盲端,形成肾小囊时,不像软骨鱼类如小点猫鲨(Scyliorhinuscaniculus)[7]、爬行类等形成明显的匙状结构[9],而是形成一内陷杯状结构,这与细鳞大麻哈
鱼(Oncorhynchusgorbuscha)等硬骨鱼类相同[1]。这
可能与硬骨鱼类发育过程中中肾肾单位的不定向发生、肾小管局部形成团状结构有关。(7)肾单位发生的活跃区域是肾边缘区域。南方鲇中肾肾单位的发育模式(图1)
。
图1 南方鲇中肾肾单位的发育模式图(A—G代表发育顺序)
Fig11 Themeso2nephricdevelopmentalschematicdiagramofsilurusmeridionalischen
GMC:肾小球间充质细胞(Glomerulargenicmesenchymalcells);MCC:间充质细胞(Mesenchymalcells);MCM:生中肾细胞团(Mesonephrogeniccellularmass);MD:中肾管(Mesonephricduct);MNV:中肾小泡(Mesonephricvesicle);RTB:肾小管芽(Renaltubulebud);PRC:原始肾小囊(Primalrenal
capusule);RC:肾小体(Renalcorpuscle);RT:肾小管(Renaltubule);SND:次级中肾管(Sub2mesonephricduct);SNV:次级中肾小泡(Sub2mesonephricvesicle)
313 中肾组织在幼鱼与成体的差异及PAS染色在
肾发生过程中的意义
南方鲇中肾组织和肾单位在幼鱼和成鱼[12]中
存在明显的差异,主要体现在:(1)幼鱼肾组织中有大量的间充质细胞充满各发育时期的中肾肾单位,成鱼则极少观察到。幼鱼的间充质细胞、发育中的中肾肾单位随着鱼体的成熟逐步减少。(2)幼鱼肾小管PI部分具有丰富的嗜伊红颗粒,成鱼PI则缺乏,但有一些处于成熟期的肾单位中,则可以看到此类情况。幼体和成体中肾组织存在的这些差异可能与肾单位发育过程中所处的生理状态有关,幼鱼肾小体发育尚未完成,滤过屏障的通透性较大,导致PI细胞对原尿中大分子物质重吸收作用加强,从而
中肾单位发育过程中,随着血管球毛细血管、肾小管上皮细胞的形成和分化,逐渐形成基膜,基膜构成上皮与结缔组织间的界面,起支持、连接和固着作用,上皮基膜的形成表明上皮组织结构和功能的稳定。如同成体肾单位[12],在肾小管发育成熟并行使功能的过程中,上皮的相关结构如刷状缘有大量的糖类物质存在,同时肾小管,尤其是PI有大量颗粒出现,因此,PAS反应能够反映肾单位发育状况和功能状况。
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在细胞质中形成强烈的嗜酸性颗粒。处于生长旺盛期的亚成体,肾组织中也常常可以观察到处于成熟
期的中肾肾单位,但不同的是,成熟期肾单位除颈段外各段上皮中均有大量深染细胞,即电镜下观察到的游走细胞[12]。3月龄前幼鱼肾小管则很少发现。
PAS染色是显示多糖类的重要方式,在肾单位发
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YUEXing2Jian1,2,ZHANGYao2Guang1,XIEBi2Wen1,2andWANGZhi2jian1
(1.SouthwestUniversity,KeyLaboratoryofEco2environmentsinThreeGorgesReservoirRegion(MinistryofEducation),KeyLaboratoryof
FisheryScienceandTechnology,Chongqing 400715,China;2.ChemistryandLifeScienceDepartment,NeijiangNormalUniversity,Neijiang 641112,China)
Abstract:Inordertofindouttherulesofthemeso2nephricgenesisandnephron’sdevelopmentofthefishes,theembryos,lar2vaeandjuvenilesofSilurusmeridionalisforexperimentation,whichwerehatchedbycontrollingthetemperature,werefixedinSmith’s,Boun’s,andCarnoy’sliquidfromMarch,2001toMarch,2002.Themethodsofhistologyandhisto2chemistrywereappliedtostudythedevelopmentofthekidneyinthecatfish.Theresultsareindicatedasfollowing:Thegenesisofmesonephrosstartedat24hafterhatching.Theprocessofmesonephricgenesisandnephrondevelopmentincludesthemesenchymalcellsas2semblingstagefrom24hto48hafterhatchingwhichdividedandassembledintomesonephrogenicbridge,themesonephricvesicleandtherenaltubulebudformingstagefrom4dto5dafterhatching,thedevelopmentstageofprimarynephronfrom6dto10daf2terhatching,theprimarynephronmaturingandthesublevel,thethirdclassnephronformingstagefrom16dto19dafterhatch2ing.Whenthepronephronwasdisintegrationat19dafterhatching,theprimarynephronstartedtowork.Inthekidneyoflarvaeorjuvenilesbetweenthreemonthsandtwoyears,therearealotofmesenchymalcellsanddevelopingnephronsinvariousstages:theprodefferentiationstage,thedifferentiationstage,thedevelopingstageandthematurestage.Theprodifferentiationstageistheformingofmesonephrogeniccellularmassandrenaltubulebud.Therenaltubuledifferentiatesintoproximalsegmentinthedifferentiationstage.Therenaltubuledifferentiatesintoeverydiscriminatingsegmentsinthedevelopingstage.Thenephronisworkinginthematurestage.Itisobviousvariationswithadult’srenaltissue.EspeciallythereareabundantinlargePAS2positivegranuleinepitheliaoftheprimaryproximalsegmentbecausethenephronisprematureandtheglomerulusiseasilypermeable.Therearealargenumberofdevelopingnephronsinkidneyofthelarvaeorjuvenilesbetweenthreemonthsandtwoyears.Keywords:Mesonephros;Nephron;Histology;Development;SilurusmeridionalisChen
3期岳兴建等:南方鲇中肾的发生及肾单位的发育 371
图版Ⅰ 南方鲇中肾的发生
PlateⅠ GenesisandDevelopmentofMesonephrosinSilurusmeridionalis
1.出膜24h过体中部横切示wolffπs管背部的间充质细胞.HE;2.出膜后48h过体中部横切示生中肾桥.HE;3.出膜48h过8肌节横切示吴尔夫氏管增
长而发生扭曲及其间少量的间充质细胞.HE;4.出膜4d过体中后部横切示生中肾细胞团.HE;5.出膜4d过体中后部横切示生中肾小泡.HE;6.出膜后5d过体中部横切示肾小管芽.HE;7.出膜6d过体中部横切示肾小管延长、扭曲,早期肾小体毛细形成.HE;8.出膜8d示wolffπs管与次级中肾管贯通.PAS2H;9.出膜10d纵切示肾小管上皮顶部PAS阳性物.PAS2H;10.出膜16d次级中肾管上诱导形成生中肾细胞团.PAS2H;11.出膜19d幼体中肾,
μ 肾单位发育至成熟期.PAS2H;12.出膜19d示中肾管细胞高柱状.PAS2H(标尺=25m)
1.Transversesectionthroughthemiddlepartof24hlarvaafterhatchingshowsmoremesenchymalcellsonthebackofthewolffπsduct.HE;2.Transversesectionthroughthemiddlepartof48hlarvaafterhatchingshowsmesonephrogenicbridge.HE;3.Transversesectionthroughtheeighthsegmentof48hlarvaafterhatch2ingshowstwistywolffπsductandthemesenchymalcells.HE;4.Transversesectionthroughthepostmedianpartof42daylarvaafterhatching(DLAH)showsmesonephrogeniccellularmass.HE;5.Transversesectionthroughthepostmedianpart4DLAHshowsmesonephricvesicle.HE;6.Transversesectionthroughthemiddlepartof5DLAHshowsrenaltubulebud.HE;7.Transversesectionthroughthemiddlepartof6DLAHshowstherenaltubuleandtheprimalrenalcorpus2cle.HE;8.Transversesectionthroughthemiddlepartof8DLAHshowswolffπsductiscommunicatedwithsublevelmeso2nephricduct.PAS2H;9.Sliversectionof10DLAHshowsPASpositiverenaltubulecelltop.PAS2H;10.Mesonephrogeniccellularmassisinducedbysublevelmeso2nephricductat16DLAH.PAS2H;
11.Thenephronisinmaturestageat19DLAH.PAS2H;12.ThecellofMeso2nephricductishighcolumnarepitheliumat19DLAH.PAS2H(Bar=25μm)
3:右后主静脉;△:结缔组织;→:PAS阳性顶部;DA:背大动脉;MCC:间充质细胞;MD:中肾管;MNB:中肾桥;MNM:生中肾细胞团;MNV:生 中肾小泡;NC:脊索;RC:肾小体;RT:肾小管;RTB:肾小管芽;S:体节;SND:次级中肾管;WD:wolffπs管
3:Rightposteriorcardinalvein:△:connectivetissue;→:PASPositivetop;DA:Dorsalaorta;MCC:Mesenchymalcells;MD:Meso2nephricduct;MNB:
Mesonephrogenicbridge;MNM:Mesonephrogeniccellularmass;MNV:Mesonephricvesicle;NC:Notochord;RC:Renalcorpuscle;RT:Renaltubule;RTB:Renal
tubulebud;S:Somite;SND:Sublevelmeso2nephricduct;WD:Wolffπsduct
372 水 生 生 物 学 报32卷
图版Ⅱ 南方鲇中肾单位的发育
PlateⅡ DevelopmentofnephroninSilurusmeridionalis
13.分化前期,中肾管及其诱导产生生中肾细胞团(MCM).PAS2H;14.分化早期肾单位.PAS2H;15.分化晚期肾单位.PAS2H;16.发育早期肾单
位.PAS2H;17.发育晚期肾单位.PAS2H;18.成熟期肾单位显示肾小体(RC)、颈段(NS)、第一近端小管(PI).PAS2H;19.成熟期肾单位显示颈段(NS)、第一近端小管(PI).PAS2H;20.成熟期肾单位第二近端小管(PII.PAS2H;21.成熟期肾单位第一近端小管(PI).PAS2H;22.成熟期肾单位
第二近端小管(PII).HE;23.成熟期肾单位远端小管(DS)、集合管(CS).PAS2H;24.2月龄幼鱼收集管.HE;25.2龄鱼肾中处于成熟期的中
μ 肾单位HE(标尺=25m)
13.Prodifferentiationstage,meso2nephricductandmesonephrogeniccellularmass;14.Thenephroninearlydifferentiationstage.PAS2H;15.Thenephroninlat2erdifferentiationstage.PAS2H;16.Thenephroninearlydevelopingstage.PAS2H;17.Thenephroninlatelydevelopingstage.PAS2H;18.Nephroninmaturestageshowingrenalcorpuscle,necksegment,primaryproximalsegment.PAS2H;19.Nephroninmaturestageshowingnecksegment,primaryproximalsegment.PAS2H;20.Secondaryproximalsegmentofnephroninmaturestage.PAS2H;21.Primaryproximalsegmentofnephroninmaturestage.PAS2H;22.Secondaryproximalsegmentofnephroninmaturestage.HE;23.Distalsegment,collectingsegmentandSecondaryproximalsegmenofnephroninmaturestage.PAS2H; 24.Collectingductofkidneyof22monthlava.HE;25.Nephronof2yearoldindividualinmaturestage.HE(Bar=25μm)
CD:收集管;CS:集合管;DC:深染细胞;DS:远端小管;MCC:间充质细胞;MNM:生中肾细胞团;NS:颈段;RC:肾小体;PRC:早期肾小体;P:
近端小管;PI:第一近端小管;PII:第二近端小管
D:Collectingduct;CS:Collectingsegment;DC:Darkcell;DS:Distalsegment;MCC:Mesenchymalcells;MNM:Mesonephrogeniccellularmass;NS:Necksegment;
RC:Renalcorpuscle;PRC:Primalrenalcorpuscle;P:Proximalsegment;PI:Primaryproximalsegment;PII:Secondaryproximalsegment