保健食品中总黄酮的测定
1试剂
1.1聚酰胺粉
1.2芦丁标准溶液:
称取5.0mg 芦丁,加甲醇溶解并定容至100mL ,即得50ug/mL。
1.3乙醇:分析纯。
1.4甲醇:分析纯。
2分析步骤
2.1试样处理:称取一定量的试样(大约0.5g) ,加乙醇定容至25 mL,摇匀后,超声提取20min ,放置,吸取上清液1.0 mL,于蒸发皿中,加1g 聚酰胺粉吸附,于水浴上挥去乙醇,然后转入层析柱。先用甲苯洗,甲苯液弃去,然后用甲醇洗脱黄酮,定容至25 mL 。此液于波长360nm 测定吸收值。同时以芦丁为标准品,测定标准曲线,求回归方程,计算试样中总黄酮含量。
2.2芦丁标准曲线:
吸取芦丁标准溶液:0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL 于10mL 比色管中,用甲醇定容至刻度,摇匀,于波长360nm 比色。求回归方程,计算试样中总黄酮含量。
3计算和结果表示:
X =
式中: A ⨯V 2⨯100 V 1⨯M ⨯1000
X —试样中总黄酮的含量,mg/100g;
A —由标准曲线算得被测液中黄酮量,ug ;
M —试样质量,g ;
V1—测定用试样体积,mL ;
V2—试样定容总体积,mL 。
计算结果保留二位有效数字。