第五 氨章酸和蛋基白质取工艺提
基
要本
求解了氨酸和蛋白质的理化性基质和分类, 及以种生各理活;性掌握 氨酸基和白蛋的质取工提艺 .例
实
第一节
概述一
蛋白质的理化,性质1 蛋.质的胶体白质 性分量:1子万-万百间之 分;大子:小达已到胶粒-110nm0范之内; 围亲水:球状蛋性质白的面多表亲基水,团具 烈的吸强水分引子用作表;形面一水成化 膜;阻蛋白质颗止粒相的聚互. 扩散速集度,不易透慢半透膜过黏,度大.
2.
蛋白质等电的点
蛋白质由种各基氨酸成, 不同组的电等点所含的碱性氨:酸基和酸氨性基酸的数 不目同有,各等电自. 等电点点碱偏性:含碱氨基性数酸较多; 目电点偏等酸性含:酸性基氨酸数目多较
;体体人中许多蛋液质的白电点为等HP50.右左 以,负离子形存式在.
3蛋白.的变性质次(键,二级硫的破键坏
)性变白质和天蛋然白蛋质最明显的别差:溶 解降度,同时低白蛋的质度黏加增 结,性晶坏破生物活,丧失性, 易被蛋酶白解分. 引起白蛋质变的原性因:(物理化学和 物)理素:因加,热加,压脱,搅拌,振荡水, 外线紫照,射声波等;超化 因学:强酸,素强,碱素,重尿属金等;盐
不可逆性变许多蛋:质白变时被严重破性,坏不能复恢
.
4
蛋.质白的沉淀
白蛋质淀:沉蛋质白分子凝从聚溶液中出的析现. 变性象蛋质一般白易沉于淀 但也,不变可性而蛋使白沉质淀. 起蛋引白沉质淀方法的 a.:盐析 :加入量大中的盐以性坏蛋破质的白胶稳体 定而使性析其出 .常用盐:硫的铵酸硫酸,钠,氯钠化.
等
起蛋引白质淀沉的法:
方.b金重盐属淀蛋沉白质:蛋 质可与白金重属 H如,gPb结合成等盐沉;淀沉 的条件以淀pH大稍等于点电宜. 临床上为利蛋用质白能与金重盐属结的性质,合 救抢服误重属盐金毒的病中人 c.生物碱试剂.以某些及类酸淀蛋沉质:结合成 白不溶性盐沉的; 沉淀的条淀件为p小于等H电点.
引
蛋白起质沉的淀法方
d.:机有溶沉淀剂蛋白: 可质与水合混的机溶有 ,剂酒如,精醇,丙酮甲等破,蛋坏质白颗的粒 化水,在等电点时使膜白质蛋淀; 沉酒精消如灭毒. e菌.热凝加:固将接等电近点蛋白的溶液加质,热 使蛋可白凝质固淀;沉
二
,白质,氨基蛋酸的分
类1.蛋白的分类
质组按上分:单成蛋白纯质和合结白质蛋 纯单蛋质白水解后:生只成基氨酸蛋的质.白根 功能据类:分酶蛋,结构白白蛋和藏蛋储白 酶蛋白数量:丰最,富种生多反化应的催化作用; 结构蛋:控制白胞细的壁长伸 ;藏蛋白储:藏贮质物个哦嫩构,长生利.用按功 能类分活性蛋:质白和非性活白质 蛋性活蛋白质:,酶激蛋白素质受体蛋,白等质; 非活蛋性质白:原胶白蛋,角蛋白等
.三
蛋白质,氨,基的酸生理能
降功蛋白解需配质对的能功肽,不保持仅 原有
的
蛋白营质成养分及能,且功强功化能 ,有具极强活的性多样和性 小.肽防治高血压,可血脂,心高病, 抗脏化氧,抗病,提毒机高免体力等疫生理活性 .
第二
节氨基 和蛋白质酸的提取工特性
业蛋质白的提取工业特性
1
.水液溶取提法
溶于水稀盐,,稀酸稀碱的或蛋质白或酶均,可稀盐用溶液或缓冲溶 液取. 一提般稀溶液用量盐原材为料3的6倍体-积可一次性提, 或取次提取.
分
意因注:
盐素浓度:般一0.在0-202mo./l; LH:一p选择在被般取的蛋提白等电质点两侧的稳区定内.如: 胞色素C(碱细性白蛋)质常用,稀酸提取 温.度不:加热,通要常低求温作.操
蛋
白质的取提工特性业2
有机.剂提溶取
难溶于法,稀水盐稀,或酸碱的稀,和脂质合 交结牢固的蛋白或酶质,常用机有剂提溶.取 丙醇,乙醇,正丁醇等,异同有时亲性脂和亲水性 .
3
.从细膜胞上提水溶取蛋白性质的方法
蛋
质和白提取酶的进后步纯化一 用常方法的有: ① 析法盐 ;② 等点电淀法; 沉③有 溶剂分级机分离;法 ④层析 法(凝过胶滤层析离,交换层析,子吸附 层析); ⑤等电泳 ;法 ⑥结纯晶化.
等
举例:
凝素:(集使能细红凝胞集蛋白的质
)采用理盐生或缓冲水溶提液 取进需步纯一
化
取液直提上接Sehpdax柱e纯化,提取 液过通定固配体化的亲柱和,化纯硫
铵酸分级淀沉 老(艺工) 配为糖体蛋白,糖肽
等