尿生成的影响因素实验
模拟实验17 尿生成的影响因素
【目的】
学习输尿管插管或膀肮插管技术和尿的收集方法。观察刺激迷走神经和静脉注射生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素等药物对尿量及尿中某些成分的影响，分析这些因素的作用机制。
【原理】
尿生成过程包括肾小球的滤过作用及肾小管与集合管的重吸收和分泌作用。肾小球滤过作用的动力是有效滤过压，而有效滤过压的高低主要取决于以下三个因素：肾小球毛细血管血压、血浆胶体渗透压和囊内压。正常情况下，囊内压不会有明显变化。肾小球毛细血管血压主要受全身动脉血压的影响，当动脉血压为80~180mmHg时，由于肾血流的自身调节作用，肾小球毛细血管血压均能维持在相对稳定水平，但当动脉血压高于l80mmHg或低于80mmHg时，肾小球毛细血管血压就会随血压变化而变化，肾小球滤过率也就发生相应变化。另外，血浆胶体渗透压降低，会使有效滤过压增高，肾小球滤过率增加。影响肾小管、集合管泌尿机能的因素，包括肾小管溶液中溶质浓度和抗利尿激素等。肾小管溶质浓度增高，可妨碍肾小管对水的重吸收，因而使尿量增加；抗利尿激素可促进肾小管与集合管对水的重吸收，导致尿量减少。
【预习要求】
1．仪器设备知识 参见第二章第三节 RM6240微机生物信号采集处理系统（或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统）。
2．实验理论 实验动物知识参见第二章第一节 生理科学实验常用实验动物的种类；第四章第一节 动物实验的基本操作、第四节 实验动物手术；统计学知识参见第5章第四节 常用统计指标和方法；生理学教材有关动脉血压的调节和肾脏泌尿功能的调节内容，药理学教材有关垂体后叶素，呋塞米的药理作用及机制内容。检索全文数据库中的相关研究论文，检索方法参见第五章第五节。
3．预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。
【材料】
家兔，200g/L氨基甲酸乙酯，生理盐水，200g/L葡萄糖，0.1g/L去甲肾上腺素，1000U/L垂体后叶素，10g/L呋塞米（速尿），6g/L酚红，100g/LNaOH，斑氏试剂；膀胱插管，压力换能器，微机生物信号处理系统。
【方法】
1．仪器连接和参数设置
（1）颈动脉血压测量记录装置。将血压换能器固定于铁支柱上，其位置应与心脏在同一平面。压力换能器输出线接微机生物信号处理系统一输入通道。
（2）仪器参数设置
① RM6240系统：压力换能器输入通道模式为血压，时间常数为直流，滤波频率100Hz，灵敏度12Kpa，采样频率800Hz，扫描速度500ms/div。连续单激刺激方式，刺激强度5~10V，刺激波宽2ms，刺激频率30 Hz。
② PcLab和MedLab系统：压力换能器输入通道名称为血压，通道放大倍数200、直流耦合（下限频率DC）、上限频率30Hz，采样间隔2ms；串刺激方式，波宽2ms，刺激强度5~10V，时程1s，频率30 Hz。
2．手术准备
（1）静脉麻醉 从兔耳缘静脉注射200g/L氨基甲酸乙酯(1g/kg体重)。待兔麻醉后，将其仰卧，先后固定四肢及兔头。
（2）颈部手术 剪去颈前部兔毛，正中切开皮肤5~6厘米，用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉，暴露气管及与气管平行的右血管神经鞘，细心分离出右侧鞘膜内的迷走神经，在神经下穿线备用。分离左侧颈动脉插管，行颈动脉插管。静脉注射肝素，剂量为1000u/kg体重。记录血压。
（3）腹部手术 从耻骨联合向上沿中线作长约4厘米的切口，沿腹白线打开腹腔，将膀胱轻拉至腹壁外，先辨认清楚膀胱和输尿管的解剖部位，用止血钳提起膀胱前壁(靠近顶端部分)，选择血管较少处，切一纵行小口，插入插管后膀胱即随着尿液的流出而缩小。如膀胱壁较松驰而膀胱容积仍较大时，可用粗线将膀胱扎掉一部分，使膀胱内的贮尿量减至最少。用线结扎膀胱颈部以阻断膀胱同尿道的通路。
使插管的引流管出口处低于膀胱水平，用培养皿盛接由引流管流出的尿液，手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。
【模拟实验操作方法】
1．模拟实验窗口（图6-2-12） 家兔颈部动脉插管用三通压力换能器和水银检压计相连，水银检压计指示动脉血压，仿真记录仪记录血压曲线。
2．手术刀 鼠标点击手术刀并拖动至家兔颈部释放，启动动脉插管和膀胱插管录像，动脉插管录像结束，记录仪描记动脉血压曲线，膀胱插管录像结束，尿量开始记录。鼠标点击手术刀并拖动至家兔颈部手术放大图的神经上方释放，切断神经。
3．仿真三道记录仪 第一道记录动脉血压曲线，第二道记录尿量，第三道记录实验项目标记。仿真记录仪面板设灵敏度、位移、纸速调节按钮，面板设数字显示框，分别显示记录仪第一道灵敏度、动脉血压、尿量、实验项目。
4．刺激器 打开电源开关后，鼠标器点击刺激电极拖动至家兔颈部手术放大图的神经上方释放，刺激迷走神经。
5．注射器 鼠标器点击注射器拖动至家兔耳部上方释放，向输入框输入药品剂量，点击确定，药品从家兔耳缘静脉注入。静脉注射的药品剂量如下：
（1） 1:10000 去甲肾上腺素
（2） 0.9% NaCl
（3） 20% 葡萄糖
（4） 0.6% 酚红
（5） 速尿
（6） 垂体后叶素
注射 0.3ml 注射 20ml 注射 5ml 注射 0.5ml 注射 5mg/Kg 注射 2u