实验十九 血清钾测定
（火焰光度法）
【目的】
1. 熟悉火焰光度法测定钾的原理和方法。
２. 掌握血清钾测定的参考范围及临床意义。
【原理】
火焰光度分析法是一种发射光光谱分析，被测溶液经压缩喷雾变成雾状物后，与可燃气混合燃烧成火焰。由火焰激发后各元素可发射出特有的光谱，样品中钾、钠原子受到火焰热能的激发而处于激发态，激发态的原子不稳定，迅速回到基态放出能量，发射出元素特有波长的辐射谱线。钠的特征谱线为589nm(黄色) ，钾的特征谱线为767nm(深红色) ，用相应波长的滤光片将谱线分离，然后通过光电管或光电池转换成电信号，经放大器放大后进行测量。样品中钾、钠的浓度越大，所发射的光谱就越强。用已知浓度的标准液与待测标本比较，即可计算出标本中钾、钠的浓度。
火焰光度法测定钾有两种方法。①内标法：用含一定浓度的锂盐稀释液稀释样品，经火焰激发溶液中的钠、钾、锂，各自产生特异光谱，分别通过相应滤光片，照射在光电管上产生各自的光电流，并与锂（浓度恒定）产生的光电流比较，即可得出钠、钾的含量。②外标法：用去离子水稀释样品，并雾化，经火焰激发钠、钾产生特异光谱，钠589nm ，钾767nm 。浓度与光谱强度在一定范围内成正比。
内标法要求燃料纯度高，但精确度较好。外标法干扰因素多。
【器材】
火焰光度计、可燃气、试管、试管架、吸管。
【试剂】
钾钠标准液：K + 4mmol/L； Na + 140mmol/L。
【操作】
1. 开机测定程序
① 按下地面插座上红色开关，马达自行开动。
② 向上扳动仪器面板上的电源开关，见指示灯亮。
③ 持续按住红色点火按扭同时逆时针缓慢转动燃气开关，观察窗内电热丝变亮，出现由小火，逐渐变成大火。
④ 放开点火按扭，进样开关逆时针转至开的位置，观察窗内见兰色火焰。
⑤ 调节燃气开关，使观察窗内火焰呈绿色轮廓清晰的梅花圈状。
⑥ 用去离子水将仪表表头指针调至零点。
⑦ 标准K 、Na 溶液以100倍稀释后，将钠离子仪表表头指针调至70％，将钾离子仪表表头指针调至40％。
⑧再用去离子水将仪表表头指针调至零点。
⑨样品血清用去离子水100倍稀释，进样后读数并记录。根据公式换算，可得到血清钾浓度。
2. 关机程序
① 关闭仪器面板上的电源开关。
② 关闭马达开关。
③ 等待观察窗内火焰熄灭后，将燃气开关顺时针关闭到底。
④ 将进样开关顺时针转动到底。
⑤ 使用完毕，做好仪器周围的清洁整理工作，并做好仪器使用登记。
【计算】
根据以下公式换算，可得到血清钾浓度：
血清钾浓度 = 血清读数／标准液读数×标准液钾浓度
读数与钾浓度的关系如下：
40％ ＝ 4mmol/L
30％ ＝ 3mmol/L
20％ ＝ 2mmol/L
若样品读数大于50％，则将血清对信稀释，进样后读数与钾浓度的关系如下：
40％ ＝ 8mmol/L
30％ ＝ 6mmol/L
20％ ＝ 4mmol/L
【正常参考范围】
血清钾 3.5-5.1mmol/L
【临床意义】
1．血清钾降低 血清钾浓度低于3．5mmol ／L 为低血钾，临床上常见于：
(1)胃肠道失钾：如严重腹泻、呕吐、胃肠引流。
(2)钾排出增多：如肾上腺皮质功能亢进、肾小管性酸中毒时、长期使用皮质激素或利尿剂等。
(3)钾的进食量不足：如患者长期不能正常饮食、手术后长期禁食等。
(4)细胞外钾内移：如碱中毒时、用胰岛素治疗糖尿病。
2．血清钾增高 血清钾浓度高于5．5mmol ／L 为高血钾。：临床上可见于：
(1)钾排出减少：如各种原因引起的少尿症、闭尿症，急性肾衰竭，肾上腺皮质功能减退（艾迪生病) 。
(2)细胞内钾外移：如严重溶血、组织挤压伤、大面积烧伤，组织缺氧及酸中毒。
【注意事项】
1．标本溶血或延迟分离血清均可使血清钾浓度明显增高(红细胞内钾浓度远高于血清) ，故应及时分离血清。若不能立即测定应将血清置于具塞试管内冰箱保存。
2．测定用的玻璃器皿必须用去离子水冲洗干净，不得有离子污染。
3．火焰光度计的各种管道应保持畅通，不得有堵塞，燃料气压与助燃气压应保持恒定及适当比例。
4．尿液标本钾、钠浓度波动范围大，故稀释倍数要作适当调整，：使尿钾的测定浓度在lOmmol ／L 以内。
5．严重的高血脂和高蛋白血症的血清标本，会出现假性低钾钠现象。原因是脂质和蛋白质占据了一定体积，使得单位体积血清中水量明显减少。
【结果及分析】
【思考题】
1. 火焰光度分析法测定血清钾的原理是什么？有哪两种方法，各有何特点？
2．标本溶血血清钾测定有何影响？