食品工艺
食品研究与开发
２００８年４月第２９卷第４期
ｉｉ９＝＝．
超声波法提取普洱茶多糖的工艺
安卫征，王一飞，赵晓华
（暨南大学生物医药研究开发基地，广东广州５１０６３２）
摘要：采用超声波浸提法从普洱茶中提取多糖，用硫酸一苯酚法显色，在４９０ｎｌｌｌ处运用分光光度计测其含量；考察了超声波功率，浸提固液比，超声波处理时间对多糖提取率的影响，并以正交试验设计优化工艺条件，结果表明：影响
普洱荼多糖提取率因素的主次关系是功率＞浸提固液比＞时间。正交实验最佳条件：功率８００Ｗ，固液比１：５０，时间
２５
ｍｉｎ。为提取普洱茶多糖的开发提供了可靠的实验依据。
关键词：超声；提取；普洱荼；多糖
ＥＸＴＲＡＣＴＩＯＮＯＦＰＯＬＹＳＣＣＨＡＲＩＤＥＦＲＯＭＰＵ’ＥＲＴＥＡＷＩＴＨ
ＵＩ肥ＡＳＯＮＩＣ
Ｗ－ＡＶＥ
ＡＮＷｅｉ－ｚｈｅｎｇ，ＷＡＮＧＹｉ－ｆｅｉ，ＺＨＡＯＸｉａｏ－ｈｕａ
（ＢｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅＲｅｓｅａｒｃｈ＆ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＣｅｎｔｅｒ；ＪｉｎａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０６３２Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ）
基金项目：国家自然科学基金和广东省人民政府自然科学联合基金（Ｕ０６３２０１０）
作者简介：安卫征（１９８０－），男（汉），在读硕士，专业方向：中药药理学。
３．１．２理化指标
氨基酸态氮：０．１０
５．５０
ｇ／１００
产的连续进行，且可降低生产成本１５％～２０％。
ｍＬ；总酸（以乙酸计）：
ｍＬ；
冬果梨醋含有丰富的微量氨基酸和人体需要的各种微量元素，不仅可以做食醋，还可以用于配制营养丰
ｇ／１００ｍＬ；不挥发酸（以乳酸计）：０．６７ｇ／１００
ｇ／１００ｍＬ。
还原糖（以葡萄糖计）：１．１３．１．３微生物指标
富的、具有一定疗效的保健醋饮料，尤其是与蜂蜜配
合。经添加少量香精、蜂蜜、防腐剂等勾兑后制成保健
细菌总数≤５０００个／ｍＬ；大肠杆菌数≤３个，ｇ；致病菌数：未检出。３．２分析讨论
在进行冬果梨榨汁操作中，加入２％的Ｖ。不但可以防止果汁氧化褐变，而且还可以增加梨汁的Ｖ。含
醋酸饮料，更加突出冬果梨与蜂蜜润肺、止咳、清燥的
作用。加热饮用，尤其适合秋冬季节饮用。
参考文献：
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研究们．中国调味品，２００ｌ，（０８）：１５—１８＋１０
量，提高果醋的健康品质。
冬果梨汁中含有少量的果胶和淀粉质原料，可导致果醋的发酵和澄清困难，添加适量的果胶酶、淀粉酶和糖化酶，不仅提高了原料利用率，还可以提高过滤的速度和果醋的澄清度，改善果醋的口味。
由于果醋发酵中产生的酸类主要是挥发性的乙酸，果醋的Ｉ：ｉ味比较刺激。在醋酸发酵过程中加入适量生香酵母和乳酸菌，使得果醋中的酯类和不挥发酸含量得以提高，加之冬果梨中所含有的有机酸，相互调和，使得果醋的酸味柔和，改善了冬果梨醋的口感。‘使用共固定化技术生产冬果梨果醋，生产周期可比传统发酵法缩短３０％－４０％，并且省去了菌种扩大
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培养的繁重工作，提高了设备利用率。发酵过程中大大
降低了劳动强度和发酵液污染杂菌的几率，有利于生
ＣＮｌ８８０４２９［Ｐ］．獬１２－２０
收稿日期：２００７－０８－０８
万方数据
－＝＝Ｊ２Ｄ
雾００２９留４‰
第
卷第期
食墨搿囊莲器发撼疆魁磷‘熟嘲鞭燃
ｅｘｔｒａｃｔ
食品工艺
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ－ａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｉｓａｄｏｐｔｅｄｔｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＰｕ’ｅｒＴｅａ，ｕｓｉｎｇｓｕｌｐｈｕｒｉｃ
ａｃｉｄ－ｐｈｅｎｏｌｍｅｔｈｏｄａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｉｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｔｈｅｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒａｔ４９０ｎｍ．ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＵｌｔｒａｓｏｎｉｃｉｎｔｅｎｓｉｔｙ，ｒａｔｉｏｏｆｓｏｌｉｄａｎｄｌｉｑｕｉｄ，Ｕｈｒａｓｏｎｉｃａｔｉｏｎｔｉｍｅ，ｄｉａｍｅｔｅｒｏｆｍａｔｅｒｉａｌ
ｏｎ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｗａｓｓｔｕｄｉｅｄ．ＩｔＷａｓｆｏｕｎｄｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｏａｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌｃｏｎｄｉ－ｔｉｏｎｓｗａｓＵｌｔｒａｓｏｎｉｃｗａｖｅｉｎｔｅｎｓｉｔｙ：８００Ｗ，ｔｉｍｅ：２５ｍｉｎ，ｒａｔｉｏｏｆｍａｔｅｒｉａｌａｎｄｓｏｌｏｖｅ：１：５０，ｗｈｉｃｈｐｒｏｖｉｄｅ
ｐｏｒｔａｎｔ
ａｎ
ｉｍ—
ｅｔｈｏｄｆｏｒｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｏｆＰｕ’ｅｒＴｅａ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｗａｖｅ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；Ｐｕ’ｅｒＴｅａ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
普洱茶原产自云南西双版纳及思茅地区，以其独特的口味及保健功效获得人们的认可。随着糖化学技术的不断发展，人们对多糖的生物活性有了新的认识。大量的实验研究表明，茶多糖具有防辐射、降血糖、降血压、降血脂、抗凝血、抗血栓［１１、抗肿瘤、增加机体免疫力等方面的功效。植物多糖一般采取热水回流提取或浸提，需要长时间和较多的能耗。目前超声波法已经广泛运用到植物化学成分的提取，但运用到普洱茶多糖的提取鲜见报道，本文研究了用超声波技术提取普洱
茶多糖的工艺。通过单因素和正交设计实验对主要工
艺条件进行了优化。实验表明，利用超声波法提取普洱茶多糖是有明显优势的，降低了时间的浪费和能源的
耗费㈣。这为改进普洱茶多糖的提取工艺做了有益探
索，提供了实验依据。
１材料、试剂与仪器１．１材料
普洱茶：购自云南安宁海湾茶叶有限责任公司优质，用前晒干粉碎。１．２试剂
氯仿、正丁醇、葡萄糖、浓硫酸，质量分数为６％的苯酚（分析纯重蒸馏试剂）等，以上试剂均为广州化学试剂厂分析纯。１．３仪器
Ｙ９２－ＩＩ超声波细胞粉碎机：宁波新芝科器公司；核酸
蛋白测定仪：德国Ｈｅｔｔｉｃｈ公司；高速冷冻离心机：德国Ｈｅｔｔｉｃｈ公司；ＡｌｐｈａＩ－２型真空冻干机：德国Ｃｈｒｉｓｔ公司等。２实验方法
２．１超声提取工艺流程㈣
声处理——真空抽滤——滤液减压浓缩到原体积１／４
普洱茶叶粉碎（４０目）——按比例加水混合一超
——９５％乙醇沉淀（醇最终浓度７５％）——离心——沉
淀用无水乙醇，丙酮洗涤一真空干燥得粗多糖（ＴＰｓ）
２．２多糖含量的测定
本实验采用苯酚一硫酸比色法测定总的多糖含量，
万
方数据葡萄糖做标准品ｉ６ｌ。
本实验先将葡萄糖用苯酚和硫酸处理后进行紫外扫描，在４９０ｎｍ处有最大吸收。再利用不同的标准糖浓度用苯酚硫酸试剂处理后在４９０Ｂｉｎ处的吸光度制作标准曲线，再测定待测样品溶液的吸光度然后根据回归方程计算相应的浓度从而求出多糖含量。
标准曲线的制备准确称取葡萄糖２５ｍｇ于５００ｍＬ
容量瓶中，加蒸馏水至刻度，分别吸取０．４、０．６、０．８、１．０、
１．２、１．４、１．６、１．８
ｍＬ，各以蒸馏水补至２．０ｍＬ，然后加入
６％苯酚１．０ｍＬ及浓硫酸５．０ｍＬ，静止１０ｒａｉｎ，摇匀，室温放置２０ｒａｉｎ以后测ＯＤ栅，以２．０ｍＬ蒸馏水按同样操作为空白，照分光光度法在４９０处测定吸收度。
粗样品的处理准确称取粗多糖样品６ｍｇ，加蒸馏水至５０ｍＬ，配成１２０Ｉ上ｇ／ｍＬ的样品溶液。吸取样品液１．０ｍＬ，按标准曲线同法操作，测其吸光度，以标准曲线计算总糖含量。
２．３超声波法提取普洱茶多糖的单因素考察ｆ）】２．３．１超声功率对多糖提取率的影响
称取４份质量为１０９的普洱茶粉碎品，加入３０倍蒸馏水，分别用功率５００、６００、７００、８００、９００Ｗ，作用时间为２５ｒａｉｎ的条件提取，经过一系列过程得到粗多糖。２．３．２超声作用时间对多糖提取率的影响
固定功率为８００Ｗ，固液比为１：３０不变，作用时间为１０、１５、２０、２５、３０ｒａｉｎ，考察多糖提取率。２．３．３固液比对多糖提取率的影响
固定功率为８００Ｗ，作用时间为２５ｍｉｎ不变，固液比为１：２０、１：３０、１：４０、１：５０、１：６０，考察多糖提取率。２．４正交方案设计
影响超声提取茶多糖的因素很多，经初步实验选
表１因素水平表
Ｔａｂｌｅ１
ＴａｂｌｅｏｆｆａｃｔｏｒｓａｎｄｌｅｖｅＩ
水平
Ａ超声功率删
Ｂ料液比
Ｃ超声时Ｉ直ｑ／ｍｉｎ
Ｌｅｖｅｌ
Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｉｎｔｅｎｓｉｔｙ／Ｗ
Ｒａｔｉｏｏｆｓｏｌｉｄａｎｄｌｉｑｕｉｄ
Ｔｉｍｅ／ｍｉｎ
食品工艺
食墨鬻窕毒嚣发
２００８年４月第２９卷第４期
择超声功率，超声作用时间，固液比，ｐＨ值作为主要影响因素。按照单因素实验结果，选择每个影响因素的三
个水平（表１），按Ｈ３３ｉＥ交实验设计，进行提取实验。
２．５核酸与蛋白质的检测
多糖水溶液在２００ｎｍ－４００ｌｌｒｎ扫描，在２６０Ｂｉｎ及
２８０
ｎｍ处未见有吸收峰，茚三酮检测未见变色。
３结果与讨论
３．１多糖含量的测定
在实验条件下，以吸收度为横坐标，标准液浓度（ｇ／Ｌ）
为纵坐标，得标准曲线，计算回归方程为：Ｃ＝０．００７
４Ａ＋
０．０２１
７，（相关系数Ｗ＝０．９９９８）
多糖提取率＝（ＶｘＣｘｆｘＷｌｘＷ＃Ｗ３）ｘ１００％
Ｗ。：称取的干燥普洱茶叶的质量，ｇ；Ｗ：：从ｗ。中提取的粗多糖的质量，ｇ；Ｗ，：从ｗ：中称取的用于分析测
定的粗多糖的质量，ｇ；Ｖ：溶解定容后的体积，Ｌ；ｆ：多糖的校正系数，ｆ—Ｏ．９；Ｃ：从回归方程中计算得出的多糖浓度（ｓ／Ｌ）。
３．２超声提取普洱茶多糖的单因素考察３．２．１超声功率对多糖提取率的影响
超声波法是利用其产生的强烈震动、强烈空化效应以及快速的搅拌作用，加快植物的有效成分进入溶剂，图１是不同的超声功率对多糖提取率的影响。
母
褂盛辎
超声功率／Ｗ
Ｕｈｒａｓｏｎｉｅｉｎｔｅｎｓｉｔｙ／Ｗ
图１超声功率对多糖提取率的影响
Ｆｉｇ．１
ＥｆｆｅｃｔｏｆＵｌｔｒａｓｏｎｉｃｉｎｔｅｎｓｉｔｙｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
ｒａｔｅ
从实验数据可以看出，在相同的超声时间、浸提固液比、颗粒度的条件下，改变其超声强度对多糖的提取率有很大的影响，多糖的提取率随超声功率的加强而明显增加。当功率超过８００Ｗ时，提取率反而下降，分析可能是超声强度过大，降解了部分多糖，故选择８００Ｗ为适宜的功率。
３．２．２超声时间对多糖提取率的影响
．
图２是超声作用时间对提取率的影响。
实验结果表明，在提取初期提取率随着超声作用时间增加多糖的提取率增加较快，到了２５ｒａｉｎ后提取
万
方数据１２１＝＝－
率增加趋缓。分析原因可能是由于超声波具有较强的机械切作用，长时间作用反而会使大分子多糖断裂，从而影响了多糖的提取率的增加量，从实用性的角度出发，超声作用时间选择在２５ｍｉｎ左右比较合适。
冰
旃
苍赠
时间／ｍｉｎ
Ｔｉｍｅ／ｍｉｎ
图２超声时间对多糖提取率的影晌
Ｆｉｇ．２
ＥｆｆｅｃｔｏｆＵｌｔｒａｓｏｎｉｃｉｎｔｅｎｓｉｔｙｔｉｍｅ
ｏｎ
ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅ
‘＿
３．２．３浸提固液比对多糖提取率的影响
、
在作用时间为２０ｍｉｎ，超声强度为８００Ｗ，颗粒度为４０目条件下，分别对１：２０、１：３０、１：４０、１：５０、１：６０固液比进行实验，所得的结果如图３所示。
８
冰褥甾裂
Ｏ
２０
３０
４０
５０
６０
浸提固液比
Ｒａｔｉｏｏｆｓｏｌｉｄａｎｄｌｉｑｕｉｄ
图３固液比对多糖提取率的影响
Ｆｉｇ．３
Ｅｆｆｅｃｔｏｆｒａｔｉｏｏｆｓｏｌｉｄａｎｄｌｉｑｕｉｄ
实验数据表明，在其他条件相同时，改变浸提固液
比对多糖的提取率有一定的影响。在固液比为１：５０和
１：６０的多糖提取率接近，从经济实用角度出发，最佳固
液比为１：５０。
３．３正交实验方案设计（见表２、表３）
表２正交实验设计表及实验结果
Ｔａｂｌｅ２
Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎ
Ｈ＂ａｎｄｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｕｌｔｓ
＿＝＝Ｊ２２
短乳杆菌发酵香肠脂肪氧化的研究
赵辉。刘萍
（黑龙江大学生命科学学院微生物黑龙江省高校重点实验室，黑龙江哈尔滨１５００８０）
摘要：以蔬菜汁为培养基，不添加亚硝酸盐及任何防腐荆，利用短乳杆茵ＨＦｌ．２发酵生产香肠，测定了发酵香肠的
过氧化物值和ｐＨ，并对感官进行了评定，试验获得了理化和感官指标优良的产品，产品的过氧化物值表明接茵发酵
香肠比自然发酵香肠的脂肪氧化程度明显偏低，符合中式发酵香肠的特点和食品绿色健康的要求。
关键词：短乳杆茵；发酵香肠；脂肪氧化
ＴＨＥＲＥＳＥＡＲＣＨＯＦＦＡＴＯＸＩＤＡＴＩＯＮ０ＦＦＥＲＭＥＮＴＥＤＳＡＵＳＡＧＥＢＹＬＡＣＴＯＢＡＣ圮￡ＵＳＢＲＥＶＩＳ
ＺＨＡＯＨｕｉ，ＬＩＵＰｉｎｇ
作者简介：赵辉（１９７１一），男（汉），副教授，博士，研究方向：食品生物技术。
◆＿ｐ◆‘＿＿．●Ｈ＿●＿＿・●叫Ｈ●＿－◆＿－◆ｄ。◆＿。◆＿啼。＿。◆ｍ◆＿＿◆＿－◆ｄ・●一ｈ◆●”◆，●・◆’＿－・●一Ｉｌ◆＿－－卜一－◆＿ｈ◆＿－◆’＿峰¨◆＿“◆■峥¨◆＿－◆●Ｈ■１＿◆¨◆＿＿◆咖●●－－●一＿－●ＨＨＨ¨—一－◆咖●一・◆舢。—●＿。◆＿－‘●＿ｈ
续表２正交实验设计表及实验结果４
Ｔａｂｌｅ２
Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎ
结论
本实验采用超声波技术对普洱茶多糖的提取工艺
Ｕ趵ａｎｄｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｒｅｓｕｌｔｓ
进行了研究，由单因素和正交实验得出结论：影响多糖提取率的主要是功率，其次是料液比，时间影响最小。正交
试实验所获得的优化提取工艺条件为超声功率８００Ｗ，固液比１：５０，超声时间为２５ｍｉｎ，多糖得率为６．５ｌ％。
超声波提取多糖是利用超声波的空化作用加速植
物多糖成分的浸出提取，另外超声波产生的机械振动、
乳化、击碎、化学效应等也能加速多糖成分的扩散释放并充分与溶剂混合，利于提取嘲。由于超声有节能、耗时短等优点，具有非常好的开发应用前景。
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由表２正交实验结果可知，３种因素对多糖得率
的影响程度为：Ａ（超声功率）＞Ｂ（固液比）＞Ｃ（超声时间），利用超声波法从普洱茶中提取多糖的最优方案为Ａ３、Ｂ３、ｃ３。即超声功率８００Ｗ，超声时间２５ｍｉｎ，料液比为１：５０。
衰３正交实验的方差分析结果
Ｔａｂｌｅ３
Ｖａｒｉａｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ
ｔｅｓｔ
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６－－７
方差来源
ＶａｒｉａｎｃｅＳｏｕｒｃｅ
离均差平方和ＴｙｐｅｍｓｍｄＳｑｕａｒｅｓ
３．１６３１．５１０
ＶａｒｉａｎｃｅＭｅａｎ洳Ｆｑｕａｎｔｉｔｙ
２２２２
１．５８２０．７５５０．０４０Ｏ肛琵
３５．４１９
自由度方差Ｆ值显著性
ｓｉｓ．Ｐ＜０．０５Ｐ＞Ｏ．０５
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科技＇２∞１，２２（２０）：１８—１９
嘲朱良，张青，王一飞，等．昆布多糖的含量测定叨．中国海洋药物杂
志，２００５，２４（６）：４７－４８
Ａ因素ＡＦａｅｔａｒＢ因素ＢＦａｃｔｏｒＣ因素ＣＦａｅｔｏｒ误差Ｅｒｒｏｒ
１７伪８
唧９
０．０４４
０．７８６／ｂＯ．０５
注：Ｆｏａ螂＝１９．０００
由表３方差分析与Ｆ检验可知，在９５％可信程度下断定，Ａ对多糖得率的显著影响，Ｂ和Ｃ没有显著性
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２００５，２６（１０）：１２７－１２９
嗍廖建民，张瑾，沈子龙．超声波法提取海带多糖的研究田．药物生
物技术，２０｜０２’９（３）：１５７—１６０
。“
影响，三者对本实验的影响程度与极差分析结果一致。
收稿日期：２００７－０９－２３
万方数据
超声波法提取普洱茶多糖的工艺
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
安卫征， 王一飞， 赵晓华， AN Wei-zheng， WANG Yi-fei， ZHAO Xiao-hua暨南大学生物医药研究开发基地,广东,广州,510632食品研究与开发
FOOD RESEARCH AND DEVELOPMENT2008,29(4)6次
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引用本文格式：安卫征.王一飞.赵晓华.AN Wei-zheng.WANG Yi-fei.ZHAO Xiao-hua 超声波法提取普洱茶多糖的工艺[期刊论文]-食品研究与开发 2008(4)