园艺学院设施201402 李密
实验三
（一）过氧化物酶活性的测定（愈创木酚法）
一、实验目的
通过实验掌握提取POD和测定其活性的方法和原理。
二、实验原理
以愈创木酚为底物，在过氧化物酶（POD）催化下，H2O2将愈创木酚氧化成茶褐色产物。此产物在470 nm波长处有最大光吸收值，故可通过测470 nm波长下的吸光度变化测定过氧化物酶的活性。
三、材料、设备和原理
1. 材料马铃薯块茎
2. 设备光光度计、离心机、天平、研钵、容量瓶、量筒、试管、吸管
3. 试剂已配置好的反应混合液、20m mol/LKH2PO4、100m mol/L磷酸缓冲液 四、 操作方法
1.酶液制备
2．比色测定
五、实验结果
10
分钟内测定的酶液吸光度
时间（min）0 1 2
3 4
5 6
7
8
9 10 A4700.126 0.257 0.385 0.513 0.602 0.694 0.789 0.875 0.999 1.041 1.119
计算：
酶活力（0.01A470/min）=
A2−A1(t2−t1)×0.01
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