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药物分析与质量
文章编号:100128255(2001) 0420165203
甲氧苄啶注射液及颗粒剂的HPLC 法测定
张欣耘, 杨永健
(上海市药品检验所, )
摘要:建立了甲氧苄啶注射液及颗粒剂含量的H PL 。3, 0. 14%高氯酸钠溶液2甲醇(70∶30, 用磷酸调节pH 至3. 6) , 280101. 5%
(R SD 0. 23%) 和99. 3%(R . ) ～ m l 范围内线性关系良好, 相关系数为0. 9999。
关键词:甲氧苄啶; ; 测定. 7. 7+2文献标识码:A
甲氧苄啶(1) , 药典(中国药典1995年版、美国药典24版和英国药典1998年版) 中含量测定方法有非水滴定法, 分光光度法, 另有报道采用H PL C 法[1]的。1注射液和颗粒剂原标准为上海市药品标准(1980年版, 65和1993年版, 69) , 提取后分别采用紫外分光光度法和非水滴定法测定含量, 方法繁琐, 提取步骤长, 过程中易造成损失, 使含量偏低。本文建立了1注射液和颗粒剂含量测定的H PL C 法, 并对方法进行了认证。结果证明, 本法操作简便、结果准确可靠。1 仪器与试药
L C 10A 型高效液相色谱仪, SPD 2M 10AV P 型二极管阵列检测
m g
的溶液, 作为对照品溶液。
注射液:精密量取本品适量(约相当于150
m g ) , 置50m l 量瓶中, 用流动相定容, 精密量取2m l , 置20m l 量瓶中, 用流动相定容, 摇匀, 作为供试品溶液。
颗粒剂:精密称取本品的细粉适量(约相当于150m g ) , 置50m l 量瓶中, 用流动相溶解并定容; 精密量取2m l , 置20m l 量瓶中, 用流动相定容, 摇匀, 作为供试品溶液。
器, S I L 210A 型自动进样器, 色谱数据工作站(日本岛津) 。
1对照品(中国药品生物制品检定所) ; 1注射液(上海旭东海普
药业有限公司, 批号:960701、970101、970102) ; 1颗粒剂(上海衡山药业有限公司, 批号:990701、990702、990703) 。
2 方法与结果2. 1 色谱条件
色谱柱:Inertsil OD S 23柱(150×4. 6mm , 5Λm , GL Sciences Inc . )
;
流动相:0. 14%高氯酸钠溶液2甲醇(70∶30) , 用磷酸调节pH 至3. 6; 检测波长:280nm ; 进样量:20Λl ; 理论板数按1峰计算应不低于2000。典型色谱图见图1。2. 2 对照品溶液与供试品溶液的制备
取经105°C 干燥至恒重的1对照品, 精密称定, 加流动相溶解并定量稀释制成每1m l 中约含10. 1
收稿日期:2000208221
作者简介:张欣耘(1969) , 女, 主管药师, 主要从事新药审核工作。
T el :[1**********]9
. com E 2m ail :xychang @ho tm ail
图1 1供试品色谱图
A -注射液, B-颗粒剂, 1-1
2. 3 专属性2. 3. 1 光照破坏产物
取1适量, 加适量冰醋酸溶解后, 加水稀释制成
每1m l 中含10m g 的溶液, 于紫外灯(254nm 及
・166・365nm ) 下照射24h , 溶液颜色变为黄色。取适量,
加流动相稀释成每1m l 中含11m g 的溶液, 照上述色谱条件测定, 色谱图见图2。二极管阵列检测器峰纯度分析表明, 在上述色谱条件下主成分与降解产物完全分离
。
当于1测定浓度的80%～120%的系列溶液, 按“2. 7”项下方法测定, 结果见表1。
表1 回收率试验
1注射液
1颗粒剂
浓度
(Λg m l )
加入量
(m g ) 3. 测得量回收率
(m g ) 4. 4. 0384. 5695. 0635. 0665. 0665. 5636. 0876. 0966. 093
(12. 34101. 13101. 73101. 43101. 50101. 49101. 33101. 63101. 78101. 74
(m g ) 3. 9723. 9674. 4614. 9484. 9554. 9505. 4465. 9445. 9385. 953
回收率
(%) 99. 0599. 4799. 3599. 3299. 1599. 2899. 1899. 2099. 2599. 1599. 39
80. 3. 3. 4. 4924. 991
100. 1204. 9914. 991
图2h ) 1; 2, 3-降解产物
110. 1325. 4905. 989
2. 3. 2 注射液光照破坏产物
取1注射液(批号:960701) , 原瓶于紫外灯(254
nm 及365nm ) 下照射24h , 溶液颜色变为黄色。量取1m l , 加流动相稀释至50m l , 得每1m l 中含110m g 的溶液
, 照上述色谱条件测定, 色谱图见图3。二极管阵列检测器峰纯度分析表明, 在上述色谱条件下主成分与降解产物完全分离。
120. 1445. 9895. 989
平均回收率(%)
R SD (%)
101. 480. 23
99. 250. 12
2. 7 样品测定
分别取对照品溶液和供试品溶液, 在上述色谱条件下, 进样20Λl , 记录色谱图, 按外标法以峰面积计算含量, 并同时采用原标准方法, 对样品进行含量测定, 对比结果见表2。
表2 样品测定结果(标示量%)
批号
960701
1注射液
原标准法
98. 597. 399. 2
本法
102. 0101. 1102. 5
批号
[***********]
1颗粒剂
原标准法 本法
99. 9100. 399. 6
103.
0103. 4103. 7
图3 1注射液光照(24h ) 破坏产物的色谱图
1-1; 2, 3-降解产物
[1**********]2
2. 4 精密度
3 讨论
3. 1 表2的数据表明, 由于原标准法需经4步提
取1对照品适量, 配制成相当于样品测定浓度80%、100%、120%的三种溶液, 分别进样, 日内
0. 41%和0. 33%, 日间R SD (n =9) 分别为0. 32%、
R SD (n =3) 为0. 43%。2. 5 线性范围
配制相当于1对照品测定浓度的20%～200%的一系列10个溶液, 进行线性考察。结果表明, 在浓度为20～200Λg m l 的范围内, 1峰面积A 对其浓度C 的线性关系良好, 相关系数为0. 9999, 回归方程为:A =1. 78×104C +1. 70×104。2. 6 回收率试验
按处方量加入1对照品及相应的辅料, 配制相
取, 操作步骤长, 易在提取过程中造成损失, 因而含量均较H PL C 法低。
3. 2 采用光照试验获得人为破坏产物, 其色谱分离
结果表明, 破坏产物不干扰主成分分离, 因此本法同时也可用于有关物质测定。3. 3 在pH 3. 2～3. 6之间调节流动相的pH , 被测物的色谱保留时间没有变化, 考虑到色谱柱的柱寿命, 本方法采用的流动相pH 为3. 6。
3. 4 实验结果还表明, 在该色谱条件下辅料不干扰
分离。
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参考文献:
[1] Bergh JJ , B reytenbach JC . Stability 2indicating h igh 2perfo r 2
m ance liquid ch rom atograph ic analysis of tri m ethop ri m in pharm aceuticals[J]. J Ch rom atogr, 1987, 387∶528.
D eterm inati on of T ri m ethop ri m in In jecti on and Granu les by H PL C
ZHAN G X in 2Yun , YAN G Yong 2J ian
(S hang hai Institu te f or D rug Control , S hang 200233ABSTRACT :A H PL C m ethod fo r determ inati ri in on and granu les w as deve 2lop ed , u sing an inertsil OD S 23co lum n , w ith p ethano l and 0. 14%sodium p erch lo rate so lu ti on (30∶70, adju sted to 6p ho ) , at the detecti on w avelength of 280nm . T he average recoveries of and ere 101. 5%, w ith R SD 0. 23%and 99. 3%, w ith R SD 0. 12%, resp T on cu rve had good linearity in the range of 20～200Λg m l , and the co rre 2lati on 0. 9999.
Key W ords :tri m ethop ri m ; in jecti on ; granu les ; H PL C ; determ inati on
文章编号:100128255(2001) 0420167203
依托度酸缓释片含量及其甲基衍生物的HPLC 法测定
黄志红, 方 原3
(上海信谊药业有限公司, 上海200085)
摘要:建立了依托度酸缓释片含量及其甲基衍生物的H PL C 测定法。采用Phase Sep Spheriso rb OD S 21色谱柱, 乙
腈20. 05mo l L 磷酸二氢钾溶液(pH 4. 75) (45∶55) 为流动相, 检测波长225nm 。平均回收率为99. 53%, R SD 为
0. 22%。依托度酸甲基衍生物的检测采用Spheriso rb OD S 21色谱柱, 乙腈2甲醇21. 74%磷酸氢二钾溶液(13∶19∶68) , 检测波长225nm 。12甲基和82甲基衍生物的检出限分别为0. 492ng 和0. 506ng 。方法简便快速, 结果准确。
关键词:依托度酸; 衍生物; H PL C ; 测定
中图分类号:TQ 460. 7+2; O 657. 7+2 文献标识码:A
依托度酸(etodo lac , 1) 为强效非甾体抗炎药, 主要用于治疗骨关节炎和类风湿性关节炎。据报道[1], W yeth 2A yerst 公司已开发了1缓释片, 但未曾报道1缓释片的含量及其甲基衍生物的测定方法。我们参考了英国药典1998年版中1片的测定条件, 建立了1缓释片的含量及其甲基衍生物的测定方法。
1 仪器与试药
W aters 高效液相色谱仪; M 510型泵; M 486型紫外检测器; M 746型数据处理仪; 7725i 进样阀(R heodyne 公司) 。
1对照品(批号2031) , 12甲基衍生物(2) 对照品(批号2033) , 82
甲基衍生物(3) 对照品(批号2034) , 以上均为英国药典标准品, 由意大利M A SA 药厂提供; 1缓释片(批号:990702、990703、990704, 规格为400m g 片, 自制) 。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件及系统适应性试验2. 1. 1 含量测定
色谱柱:Phase Sep Sp heriso rb OD S 21(150×4. 6mm , 5Λm ) ; 流动相:乙腈20. 05m o l L 磷酸二氢钾溶液(用N aO H 溶液调节pH 至4. 75) (45∶55) ; 流速为1. 00m l m in ; 检测波长225nm 。
精密称取1对照品约25m g 置50m l 量瓶中, 加0. 1m o l L N aO H 溶液溶解并定容, 摇匀, 作为溶液A 。另精密称取2对照品约25m g 置50m l 量瓶中, 加0. 1m o l L N aO H 溶液溶解并定容, 摇匀, 作为溶液B 。分别精密吸取溶液A 和溶液B 各2m l 置
收稿日期:2000209226
作者简介:黄志红(1966) , 女, 工程师, 从事药物分析研究。
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