补料分批法高密度培养凝结芽孢杆菌 - 范文中心

补料分批法高密度培养凝结芽孢杆菌

03/10

第 --卷 第 4 期#.- . -年 #

生物 术技 ’^,*G‘Ud,,3Y]

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用间的时延, !"长#$ 渐渐扩散 至菌体噬部,内 其与部的成分起内作而用制抑菌体的复噬制 能力 从,而少噬菌减斑的形数; 因成此推可断 而不 !# "$抑 作用制位点的在菌体噬内部的 ,在外表。其 ’(()) 温及对度! #" $抑 %&# 血清牛蛋白 白制用的作影 分别测响定 了以肠杆大噬菌菌 体*#+ 为例, # ’$)( 和温度 对" !制作抑用的影。按不 响以检测其大肠 同的终浓度对别分加 ’添)(, 菌噬菌杆体 *# 的影响+;结果 表 如 +所示,其 中! ("&,的 浓 度 为 -..0/ 2 13, 作时用间 是噬斑菌数三为重复块平上板菌噬数 4./5", 之和斑。

表+ ’) 对 !"(# $ 制抑菌体噬用作的影响

. - &;%9 #9.. 88%& +.&.- 4 9.%+9 7..- + +9%8 对照 8水() +-9

表 +所 示 ’,() 能在一定程度的上降低 !" # 对$肠大菌杆菌噬 *体+ #殖增能的抑力 随制着其浓 用作 在,定一的’( )浓度围内范, 的度大,增保护 作用强增 ;当但 ’( 浓度达 到较高时) ,种这护作保就不再用强了加低 。度浓 ’()对 大杆菌噬肠菌 体*+#的 保护作 用太明不。 ’显() 对菌噬体保起护用的原作因可能 在其组于氨酸残和基半胱氨酸基残 降与 低"!#$ 的 有浓度, 从而效!"# $相互用, 作低 !降# $"对 菌噬的抑体制率。

表& 温对度! "#$ 抑大肠制菌杆噬体菌作的影响用温度 ( )=. +8 抑制率 ( : ;)7.%

#

$影响不大。在

菌噬的增殖能力体被著地显抑制 ,温低度时,抑 率略制, 低度温升后高, 于 化学由作速用度快加,抑 率也制略升高。为 总之 当浓度为 #, .>- . .0/ 213 的!"# $ 与噬菌体!用约 作+.5/" 或更长间时后,噬菌 体 复的制能力到受有效制; 抑"! # $示出显对 细菌病毒显抗明性, 且"#! 浓$越高度 ,用 时间越作,长抑制作 越明显。 病用病对毒类人的害危大较 有些,病抗毒药 如物干扰、 病素唑等, 毒由于其用作机等理 面方原, 其疗效存在一定的局限性。所因 以选筛新高的广效谱病毒药物抗, 为成急解 决需难的题。而离锌子性独质, 特极有能成可 高为效广抗病谱毒质物的中重要成, 故研分将 益于 有 究"#!$ 对病毒 抗的性征特与机理 ,揭其示谱广抗病毒本的,质 义意重大。高用活性 锌物质含行进抗人的) 型流感病毒 的实验也得获了相似的果。因此结,通 过 !# "$#将 为 !" 其它抗病# $ 抗细菌毒病的究,研 的研毒提究供有益的参, 考为高效抗毒药 物的研病开制辟新途的径

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考献文

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;表 显&了温示度 对" 抑制!肠杆大 噬菌体菌 #*+的影 。在响 &表中 ,所 用"!(&,为 -. ., 用时

间 实。显验示 /01在2 3 ..-5"/ !一 的定度范温围, 内度对温 "#!$ 抑的作用制

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料补批分高法密度培养结凝芽杆孢菌

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补料分

批高法度密养培结凝芽孢菌

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刘馨

磊 肖春明, 许,涛,延 戚薇 杜连祥

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天津轻工业学食品院程工系 天,津 &"!!!)" 摘要:研 究在摇瓶条下件通补加过有不含同度浓葡的萄糖与酵膏的料液及母同流不加方对凝结芽 孢式杆菌 (! #"$%&’ %#"()%&*’" )确定了补 料中的液萄糖与葡酵膏母例为 比,&&+菌体量 和芽生孢量的影成,响 ( 采用将葡萄糖浓度,控制 &在"0/. 12 * 3 0 . " 的流1加式方行进高密度养凝结芽培杆菌。孢 41在* #:- . -) 自发动罐中酵进行料补分批培养, 终最体菌浓度达 (/4 5到# "’6 7 . 819 芽,浓度为 #/!孢5 #" 678’ .9, 1分别 分是培养的 批/4’倍 &/和)倍。 关 键词:高密 培度; 流加养;凝结 芽杆菌孢

王华等从脱脂奶粉中分离到一近酮株型 酸乳酵发凝的结孢芽菌杆+ ,&,& 菌体及芽 孢其常见对肠的道病疾如性慢肠炎、 腹结与泻 便等秘均明有疗显。效普与通酸乳菌相, 因而 比,&+ 的优势在&于形成热耐耐酸的孢, 芽用于添加到适需加热和要酸食品性。中并且, 其孢作为活性因芽耐子受胃酸顺到利 达[# 肠道]定并植活的存力能较强 也。

#

培次与养加流养培体菌浓的度比较

密度养技术培 :(;0 6= $ >=?A;B@ 68>DC能 提发酵高液中菌的体度, 密终提高 B最E8)= [] 产!的物生比率 。目产前 ,实高现度培密 的养法很多,方 固定化和补除分批料培外养 , 有还沉降用 、离心和孔微膜使细胞截流形成 细&[] 。其,中 补 料胞循而环达高密到的方度 法批技分研术得究广最泛也常最,用 将先的进 制技术控用于应补分批培养的料究也研活很[(] 4[ ],跃 将模如糊制、控神经网络 和遗 算传 用法更于精确地控和制模发酵过程, 拟期以 到达更的效好。果本文讨论 将料补分批技应术用凝结芽于孢 杆 菌,&& 的高+密度养过培程。

图!

批次养培与流培加芽孢养度的比浓较

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料和材法方

收日期稿 修:日回期:!" # " $"%$ !; &!"" #$ "’ $( ! 基 金 目:天 项津 市 然自 科 学 基 金重 点 究研项 目 (" ")&&*#"#) 作者简: 刘介馨磊 ( #%’&$ ), 女 河,邯北郸人, 市硕研士万方数据 究 生。研究向方微物生制药

/# 材#料 结凝 孢芽 杆 +菌&& ,( "!+$%&’%# #/# /菌 株:, 本 院 微生 物 究研室 离 保分#( "&)%"’ +*&&) 存。,# #//! 养基 培(0 .)1 :蛋胨 白"/"! 酵 ,/##!// 斜#培养面 母膏 基&/",葡萄 !糖/",琼脂 /"! ,用麸水定 容至 #皮,1F %/:" 2%/! (。 . 0) :1 白胨蛋# "/, 酵 "/#/#/! !子种培养基 葡糖萄 */"", ・膏 母"/#", G0IH( :!%I "/4 ,J D K:%/F 2!% /(。 JI& "#"/ (,0 . 1 ) :蛋胨白#" ",/酵 #/ #//& !发培酵养基母 膏 #""/ ,葡萄 糖*/ ", 0GHI(・:% ! I#"/,L! :MI( !/ " G@,I( H4"F9F,F:% "/。# !/培 养法 取方 #1 斜9种面菌子

#//# !种子瓶培养:摇 接液入有 装4!19 子培养基种 !的49" 三1角瓶 ,中 "N( #,"E(. ;9 @培 !养"。P .1 的 : F值 保持 :: 在F %" 左/。右培养段,阶QKI :溶 液, () &度温: (( 补料的)流 不制控 F: 。值 (N " 加: 。流补加料分三阶个段行进 ,"2 #!

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结果与论讨

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术 #第# 卷第 %期

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" 摇瓶#件条补料液中下适碳最氮比确 定的 以葡现萄作糖源碳、酵 母作氮膏对源补料液 的氮比进碳优化。行恒速流加补料在 酵母的膏例比条 下件,流加 $ 具不种同葡萄、 糖补料液,的其 果如结 #表所示 。从表 #中可 看出,以葡萄 糖度在 浓%"& ’( 着加入随葡萄的总糖) *!+"!’ () 的围内范 量的提高, ,菌体度浓断不升, 此时葡萄糖上 菌是生体的长制限因子。比对, # 、$ ,的结果 菌体密 发,现, #加入葡萄的糖量高于 总$, 度反而较 ,$, , 低表此明度浓葡萄的不糖再对菌体 长造生限成,制 而于由,# 补 液料缺中乏 足够氨的基酸和维生素,菌体 需身合成所 需的自养分 ,而因耗消了更多能源的碳和源 ,导

料补 液 葡 萄中 与 酵 糖母膏 的 比 !例不 补 料# & &:%:" #!:# % :#

终最胞细浓度不 ,如$高 。外另 由,表# 可见 萄葡糖与酵母膏的比例对芽 孢形有成著显响影 ,萄糖与葡母膏酵 [# 的比]例低,越 芽孢度越浓高。有献报道 文 菌株 -.,//形 成 芽孢 最的适 葡 萄糖浓 为 度本验实补料中加时入补料液会造 %的&"’ )( ,成 发 酵液 中葡 糖 浓 度萄瞬 时 增 加 , 于 %"&’高 (。)时较此或高突变化然

的葡萄浓糖 抑度了芽孢的制成,形致 使# ,*,$ 芽孢的度 均浓小对于照 &,。 #,加 入的葡糖最多葡,补 时料葡萄浓糖度变也最大化 其,终芽最孢浓 度为 #仅%& 01 2(3 。) 有提高菌体浓度只才有可能提高孢浓芽 度 ,所确定补以液中的葡萄料、 糖酵母膏质的量比为 % 4。#酵

母 膏起始 浓 度 ( ’ () #&")&#&"& #"& #&&&" #&" &加 入的 酵母 总量 ( ’ (膏 ) )&"#& #"& &!"77#8"+ #!"8菌 体浓 度120 (3 %)"+5 # &+/ & 5 "&# 6#"!5 # & /6! 5 #&" $"& 56 &# 6 孢 浓 度芽012 () #3+" 5# +& #" 5 #&%&#"7 5 &+ #"+ 5 &&8 #"%75 #&

8

#表

补料

液中不同的葡萄糖酵与膏比母对例体菌深和芽度孢度的浓响影葡

萄糖 起始 浓 度 ( ’( ))% & "%" %"&&% &" %&" 加 的入 葡萄 糖 总 ( 量 ’ )( %" ) /)"& !7"/ #/"! !+#"

实!验, &# ,, !, /,$

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! 验实 :&:# ! :/

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摇条瓶下补件料加策流的确略定 高密发度成酵功关键是的补策料的选略择 也,就是根据菌的生长种点采取特理合的 9 ((9) 的萄糖 流加葡式方。以比例现为% 4 与#母膏酵混合溶为流液加物料研究适合于菌 株 -/. /的流加方式,对 三种加流式进方行 比较,其结果表 所!。

培养方式示分批 培 养补分批 补料料分批补 分料批 萄糖葡 起浓始度( ’( )) %"& %"& %"& %"& 加方式 流照对恒速 加 流速变流加 持维萄糖在 / 葡 %’ * )(的 围内 加范葡入糖 萄总量 (’( ))%"& !"/&/! & "/"!$ 体菌度浓0 21( 3) 8 "75 #& /"+ 5 &#& 6"/ 5 #&# 6"/75 &#6 孢芽度 浓021( 3) !/" 5 #&+8 7 5 "&#8+" ! #&58/ " 5 !&+#

液中葡萄糖与酵母料的膏重量如表所示比 ,二者总的度为 !& ( 浓 ’ () 。)!补料 养培中加相流同体积的料液补

,葡萄糖

流方式对菌加体浓度和孢浓芽的影度

响实

验中, 补都料开始于对数生长期 进,入平衡期后 料补结。 :#束为恒 速流, 相加于 对菌来体,说 养营浓度是渐降低逐的, 体菌比的生 速长也慢率下慢降 ,的总体量菌培养过 在程呈线形中增,加发 酵结后束发菌体现大 可以在量菌体密度 幅增加。较: 为!速变流加 高,的况情通下加过入多的营养更物质进细促 胞的长生,其 终菌最浓度体与芽浓度孢都与有文 献道报速流加比恒变速加流效: # 近相,[+ ]果 更 好,但在 本实中验者没二有显明别差 :。/ 流的方加法是将萄葡浓糖度维在持 这种方法得取较好的了 /"&’效( )* % ;’& (,)果, 菌体 度浓达/"7 5 #6& 120( 3) ,芽孢度达浓 这种几流加方式 /"& 5#&+ 102 (3 。)可看以,出对 提高菌体度效果浓均明显很 但,只 有/: 最的终孢芽度高浓对于,照 说明将葡萄浓度糖 控在适制范围内对提当高体菌浓和提度高 芽浓孢度是有都效的。最终确 采定用保葡持糖萄浓度 保持在 /"’& ()

* "%’ (&) 范围的流加内方法进行密 度培高。养万 数方据

在7 )自 动酵罐上的发补分批料培 在养确定料液中的碳氮补比和流 加 方 后, 法用7) 自动发酵进罐了菌行及体孢芽高的 密补料分批发度酵。 在&= 8在" 左右, !&%

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考文献参:[

]# 近王华, 戚,薇 莹 陈 凝"芽结杆菌孢孢芽成液体形培养基的研 [ @]究 " 津天微生,物 #6%6, :$ !$ */#" ![]李 ,民陈常庆 " 重组 肠大杆高菌度发密酵究研展 进 []@ 生物"工进展程, !&&& !&,: !% */# ;

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针菇 c\>‘ D菌株体液养培工

沈艺秀荣(

樊襄院化学化工系学, 北湖 襄樊? =?L‘) ! 要: 通过单因子摘验试统分计析 ,化优筛了适于金选针菇( ,(-%’(+)-% ./%0+1/( *) c>\‘ D的宜培适基和 养瓶摇培养件,条 结表明果, 其适的液宜体养基培成为:组L0‘d 玉米, @粉0d‘ 麸皮, ‘0=d .X"J? ,‘‘L0 dTS* ・,; 适 的宜摇瓶培条养为: 件养培的起始基 ,- X B"@?X , ‘= c* +a=‘‘ 6& ‘L *c+ a‘‘=6 &"HA0 C‘ 0‘ L‘‘&B6 摇 =@ ! ! 瓶 装为量 =L‘6& 接,种为量= ‘d , 培温养度 Le@, 床转摇速为 =‘@ a &/8, )菌丝收干率 ?=0 a*=‘‘ 6& 。键关: 词针金菇 ;体培养; 单因液试子验

金针

菌菇体的丝营养分成通大于常子实体, 而越且来越的多抗肿瘤活物质也从性 丝体菌分离中到,得 用液采发体酵术技可厂 化工年生产常针金菌菇体丝 以替代子实体在,食品 医药和方面应的已成用新的发展方为向。 菇针金\ c‘D>是一株 白高产的优纯菌 良,株笔 者采用因单子验统计分析对其试培养基和培养 件条了优作筛选化

L‘。* c+ @ a‘=‘6。& ‘‘&=6, !源氮试 验 基 础 培养基 :‘@ d 萄葡 糖 ,0=d .‘" @XJ?, ‘ 0Ld‘T* -?・XB" @, X‘ *=c= a ! + L。‘ c*+a ‘‘=6& ‘=&‘6 ! @,表

= 同碳不源对丝菌量的产响

影‘0A!!‘ L=0@‘0D L >0==A A=0L‘L ‘LA? 0源 (浓碳 @0‘d 度) 葡糖萄果糖 糖 玉米蔗 可粉溶淀粉性 甲基羧纤维钠素 菌丝量产( * a=‘‘&6

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材与方料法

金针菇 (, (

%--(’+%)./ %0+(/*1) = =0菌 种 :自购南食方菌开发用公司总 。c>‘D, =0@\培养基 斜培面基养 J[M :养培基。( 不 琼含液 种子体养 基培 J:M 培 养[ 基)脂 。碳源试 验基 培础 养基 =:‘0 d 白蛋胨, ‘0 d =". JX@ ,? 0‘‘d LT*-X・B?" X@, ‘ *c== +a

收!稿期日 :修回日:期 ‘‘@=: D‘ :A‘; ‘@=‘ := : ‘‘> 者作简介:沈秀荣 (= A> =:) ,女, 学士, 师。发表讲论 L 万方数据文 。

=0!篇 养培方法 L‘‘&: 摇6装入瓶= L‘6 培养 &基,接入 ‘d 的=液体种, 在子转旋摇式床上于 @ Le 下养培 1, >床摇速为 =@‘转8 &/a。) 度计 (酸H" - :@L , 上海型 虹=? 0" 测H定:益仪 器)厂 菌丝干重。定测 以 :?‘ 目网过筛收滤菌 丝体,集清 冲水洗! 次 D‘e 烘至恒重,。

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结与分析果

料批法分高密度培凝结芽养孢菌杆作者:

者作位单: 名: 刊文英刊名:年 ,(卷): 期被用次引数:刘 馨磊 肖春,明,许延 ,涛 戚, 薇连杜 祥津天工业轻学食院品程工,系生 技物 术BOTEICHOLONYG 001,1126( )9次

考文献(8参) 1条.王华近戚;薇陈莹 ;结凝孢芽杆芽菌孢形液成体养基的研究培 196 92.李;民陈庆 常组重大肠菌高杆密发酵研度究展进期[刊文]论生-物工进展程200 (020) .Ho3 Nam CanhgBe;om oS Kio;meoBmSo oiKmH igh endsty icellc utlue rybm ebmanreb-saedcell reccley外文期[]刊1994 4J.ongseek Leo;eaSn Ygp ueLe;Suwno narkP Cntrol ooffed b-tahc efmretntiaos[n文期刊]外1 9995 杜连祥. 业工微生物实学验术技 19296 .J A oubos;G Rvna Sraten;t AJB vn aBoxtel nA veluotoniryas trtagey orffe dbatch -biroecaor totimpiztioan cnocpte sandpe frormacne[外文刊]期 919(2-9) 37.天轻津工业学院 工业发分酵析1 9998 .克明王;竹姜茂王;雨 秋加发酵流提高产胡卜素红酵母萝量的研究产1 989(0)

2文读者也读过(本1条0) .1程书 梅.昌禄王.金兰.顾陈勉.华赵.C鹏ENHG huS-mei.WANGCh nag-ulGU Ji.n-al.nHCE MiNa-nhau ZH.O PAneg 海糖对耐盐藻酵母的响[影刊期论]文中-国造酿200(8)5 2 .森刘.林宗华敏娄文.勇L.I UenSl-i.nZNO Min-hGa.uLU WenO-ynog苏云 金菌杆补高密度培料的 养究[研期论文刊-工业微]生2物0003,(0) 4.3 郑喜.群晓兰刘张鹭..马微 一株结凝芽孢杆菌产生糖的工脂艺研[究期论文刊-微生]物学通 2001,28报(4 ).4戚 .刘薇馨.王磊建.玲陈莹路福平..连杜祥中空纤维膜 过法高密度滤养培凝芽结杆菌TQ33孢期刊 论[]文食品与-发工酵业2030,9(4) 5. 李世2杰.尚方.玲刘华梅王志.林 云金杆苏菌层发深补料分酵批培工养艺研[究期刊论文]湖-北农 业学科002,1(11) .6 王楼岁张鑫.张.之平章.银.郭良永强.WNA GuSi-luo.HANZG Xi.nZANHG Pingzh-.iHAZNGYin -iangl.G O UoYgn-qiang 性活酵干S母DO瓶摇发酵条的研件[究刊论期文]-工微业物2生00,30(3)07 .周 .虞剑龙.ZHO UiJa.Y

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U oLn g产-L乳酸凝芽结孢菌杆发酵件条初步研的[期究刊论]文-氨酸和基 物资生20源0,25(71) . 8瑞良朱牛.钟相.叶红丽几 种消剂毒对病致凝结性孢杆菌和芽雷伯克氏菌炎肺亚种消毒的效果试验 期[刊文]论中-兽国药志杂202,360(4)9 万.阜昌.云崔.闫述龙翠.F-Changu Wa.nunYLo-g nCiu.Shu-ui CYna 结凝芽孢菌活菌TB杆C619株 右旋对聚葡糖硫酸钠引发大溃鼠疡结肠炎的治性疗作用期刊[论]-文世界华人消杂化2007志,1516(

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0. 1王标诗李汴..黄娟生曾.孝庆阮征..志伟朱李..琳ANW BGai-ohiSL. IianB-Shen.gHUNAGJu an ZE.G NQni-gXio.RaAUN hZne.gZHUZ hiWe-i.I LLin超高静压协同中温 对结芽孢凝杆菌芽孢灭动力活 规律的研学[期刊论究文]-微生学物报2通080,35()4

引证

献(文9) 条.1戚薇.陈莹.建王玲房.仲志 浓度凝结高孢杆芽菌粉的研剂及特制研究性[刊论期]-天文轻津业学工院学报 0032(2)2. 晓翠王李. 杰猪乳源芽酸杆孢菌筛选的与鉴[定刊期论文]-东北农大学业报学 021(31) .3华.罗王华黄. 酒科酒球菌类D-2Sa高度密培的养研究期刊[文]-论酒酿技 20科704) (.4东良.佟崔明建王云山.张.平 凝结利孢芽菌杆工化发酵培业养基步初研究期[论文刊-食品与]酵发工 业2 00(72) 1.谷春涛5.爱铭彭萨仁娜..佟明建饲用 生微的物密高度培[期养论文]-动刊科物学与动医学 物003210)(6 陈秋红.孙梅..群.匡大施.林淮.胡凌刘虹.张娜维.夏冬.清旭朱培 养条件对结芽凝孢菌芽孢形杆成 影响[的期论文刊-生物技] 术009(2)17. 刘莹.杨华.翔丽.王华冉 松拮菌株L抗NPTC-1长生件条考察的[刊论期]文食品科技-20 0(6) 87齐士朋.徐.尼.尔罗芬玉.小丹巫细胞 密度培养技高术的用研究应展进期[刊文]论-食与品发工酵 201业12()9 .春谷涛.彭爱.铭仁娜萨佟建. 高明度密养培术对微技生制剂态的增效作用[刊论文]期中-国农业技科导报 023(03)

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