甲硝唑含量的紫外分光光度法测定

甲硝唑含量的紫外分光光度法测定

作者：陈小芳

来源：《维吾尔医药》2013年第04期

摘要：目的：建立甲硝唑含量的紫外分光光度测定方法。采用紫外分光光度法（外标法），在277nm 处检测吸光度。结果 ：甲硝唑在 7.5～17.5mg/ml的浓度范围内呈良好的线性关系，相关系数r= 0.9997，与非水滴定法 （药典法定方法）检测结果的相对偏差在0.5%以内，专属性强，准确度较好。结论 ：本法适用于甲硝唑含量的测定。

关键词：甲硝唑 含量 紫外分光光度法 非水滴定

甲硝唑为白色或微黄色结晶性粉末。有微臭；味苦略咸。其化学结构式为2-甲基-5硝基咪唑-1-乙醇。甲硝唑是临床上较常用的一种药物，可制成抗阿米巴药，抗滴虫药和抗厌氧菌药。在测定甲硝唑原料及其制剂的含量时，一些文献杂志采用正反高效液相色谱法测定甲硝唑和其他药物混合物中甲硝唑的含量[1]。中华人民共和国药典（2000年版 二部）测定甲硝唑含量为高氯酸非水滴定法[2]，中华人民共和国药典（2010版二部），测定甲硝唑及其制剂含量均采用高效液相色谱法[3]。另外一些国内杂志对甲硝唑含量采用PH 指示剂吸收度比值法测定

[4]，对甲硝唑制剂采用紫外分光光度法[5]和一阶倒数光谱法[6]来测定其含量。因紫外分光光度法相较于高效液相色谱法具有分析时间短，检测迅速而准确度高的特点，故认为采用紫外分光光度法（外标法）测定甲硝唑原料含量在要求不高的情况下，可以作为一种替代的检测方法。

1 仪器、试剂与样品

1.1主要仪器

UV-2501PC型紫外分光光度计 日本岛津仪器有限公司

1.2试剂

盐酸（分析纯 批号：20101001）

甲硝唑对照品（中国药品生物制品检定所 批号：100191-200606）。

三批甲硝唑（山西晋新双鹤药业有限公司 批号：20120525、20120601、20120603）。 2 方法与结果

2.1甲硝唑贮备液制备

精密称取于105℃干燥至恒重的甲硝唑对照品125mg 置100ml 容量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得1.25mg/ml的甲硝唑贮备液，待用。

2.2 测定波长的选择

取甲硝唑贮备液1ml 置100ml 容量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度摇匀，用盐酸溶液（9→1000）作空白对照，在230～300nm 波长范围内扫描得紫外吸收光谱图（见图

1）。甲硝唑在277nm 吸收有最大吸收峰，因此可在此波长处测定甲硝唑的含量。

2.3 标准曲线和线性范围

精密移取贮备液0.6，0.8，1.0，1.2，1.4ml 分别置于100ml 容量瓶中，加盐酸溶液

（9→1000）稀释至刻度。摇匀，制成甲硝唑浓度为7.5，10，12.5，15，17.5ug/ml供试液，用盐酸溶液（9→1000）作空白参比液，于277nm 波长处测定甲硝唑溶液的吸收度。表明甲硝唑在7.5～17.5ug/ml的范围内呈良好的线性（图2）。

线性方程：A=0.0377C+1.61×10-3（A 为吸收度，C 为浓度），r=0.9997

2.4 专属性试验

取甲硝唑（批号：20120525），精密称定，配制成浓度为12.5ug/ml的供试液（1），精密移取5ml 供试液（1）置10ml 容量瓶中为供试液（2），五份。

供试液（3）：取供试液（2），用盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度。

供试液（4）：取供试液（2），放在80℃水浴箱中8小时，取出用盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度。

供试液（5）：取供试液（2），加入1.0ml1M 氢氧化钠溶液置80℃水浴箱中30分钟，取出，用6M 盐酸溶液调PH 至1，再用盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度。

供试液（6）：取供试液（2），加入1ml 6M盐酸溶液置80℃水浴箱中2小时，取出，用1M 氢氧化钠调PH 值为1，再用盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度。

供试液（7）：取供试液（2），加1.0ml10%过氧化氢置80℃水浴箱中2小时，取出，用盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度。

取上述溶液在230～300nm 波长范围内扫描并作空白校正，结果表明各破坏性试验（酸解、碱解、高温高湿、氧化条件）的溶液在277nm 处的吸收度均有较大变化，因此紫外测定甲硝唑含量专属性强。