专利名称一种有效解除重楼种子休眠的方法
技术领域本发明涉及一种有效解除重楼种子休眠的方法。
技术背景
重楼植物隶属百合科重楼属，是多种中成药如云南白药、宫血宁、热毒清等的主要原料。随着其用途的不断拓宽，重楼资源的需求量也迅速增加。据资料统计显示，目前，可用的重楼资源将近80%已被开发殆尽，剩余的20%资源按照目前的国际国内需求分析，可能维持3 5年。因此，大规模开展重楼药用植物的栽种有非常重要的意义。
目前制约重楼植物规模化栽种生产的主要问题是重楼种苗的短缺；由于重楼植物在果实成熟时种子的胚尚发育不全，其种胚内胚芽、胚轴、胚根和子叶都还没有发育形成， 以及胚乳坚硬，内种皮表层角质化等形态后熟和生理休眠的特性，使得重楼种子在常规田间播种后通常需要经历两冬一夏才能萌发出苗，种子萌发所需要的时间较长，是典型的“二年生种子”；并且在自然状态下，即使经历了长时间休眠的重楼种子其出苗率也较低。
目前已有人就打破重楼种子休眠的技术申请了专利，如专利申请号为98118955. 5 的专利申请文件公开了一种“滇重楼种子发芽及其快速繁殖技术”，该技术是先将重楼种子用20-80ppm的赤霉素浸泡，然后再采用4°C与22°C变温交替培养，同时在培养基中添加激素和滇重楼寡糖素，以使种子最早能在2个月萌发，该技术虽然能有效打破重楼种子的休眠期，缩短种子萌发时间，但变温操作过程复杂，且最后需接入含有激素和滇重楼寡糖素的培养基中，生产成本高。发明内容
本发明的目的在于提供一种操作简单、生产成本较低的能有效解除重楼种子休眠的方法，该方法能大大缩短种子形态后熟及生理休眠的时间，使重楼种子在较短时间内萌发。
为达到上述目的，本发明采用的解决方法包括下列步骤
(1)去除外种皮选择在重楼果实成熟、果皮开裂时采收种子，将新鲜重楼种子与湿沙子混合，以相互揉搓的方式及时清除重楼种子的外种皮，并用清水冲洗干净；
(2)双氧水处理将除去外种皮的重楼种子用滤纸吸干水分后，放入1 3%的双氧水中浸泡5 10h，浸泡过程在0 8°C遮光条件下进行；
(3)赤霉素处理将双氧水处理后的重楼种子先用滤纸吸干表面，然后在18 25°C放置12 24h晾干，再将晾干后的种子放入200 400mg/L的赤霉素溶液中浸泡12 48h，浸泡过程在18 25°C遮光条件下进行；
(4)萌发培养取出在赤霉素溶液中浸泡后的种子，用滤纸吸干水分后，放在超净台上先用70 % 75 %的乙醇消毒30s，再用0. 1 % 0. 2 %的升汞消毒4 lOmin，然后用无菌水清洗三次后接种到1/2MS培养基中，在光照强度为1000 18001x、每天光照8 12h、 温度为16 25°C的培养条件下进行培养。
本发明针对重楼种子所具有的结构特点，首先将抑制重楼种子萌发的外种皮及时地清除干净，接着用适宜浓度的双氧水处理重楼种子角质化程度较高、质地坚硬的内种皮， 以增强内种皮的通透性；然后再将种子放入适宜浓度的赤霉素溶液中浸泡处理，以加速重楼种胚内各器官的形态建成和发育成熟，同时进一步促进重楼种子中贮藏物质胚乳转化为可利用状态，及时地供给种子萌发初期胚细胞分裂和器官形成的需要，完成重楼种子的形态和生理后熟，最终有效地打破重楼种子的休眠，使重楼种子从自然条件下需要2年左右才能萌发缩短到最快只需3个月左右的时间，大大地缩短了重楼种子的萌发时间。此外，本发明方法操作简单、生产成本较低，易于推广。
下面结合实施例对本发明做进一步详细说明，但本发明的内容并不仅限于此。
具体实施方式
实施例1
(1)去除外种皮选择在重楼果实成熟、果皮开裂时采收种子，将新鲜重楼种子与湿沙子混合，以相互揉搓的方式及时清除重楼种子外面红色多汁的外种皮，并用清水冲洗干净；
(2)双氧水处理将除去外种皮的重楼种子用滤纸吸干水分后，放入2%的双氧水中浸泡8h，整个浸泡过程在4°C遮光条件下进行；
(3)赤霉素处理将双氧水处理后的重楼种子先用滤纸吸干表面水分后，然后在 20°C放置18h晾干，再将晾干后的种子放入300mg/L的赤霉素溶液中浸泡36h，浸泡过程在 20°C遮光条件下进行；
(4)萌发培养取出在赤霉素溶液中浸泡后的种子，用滤纸吸干水分后，放在超净台上先用70 %的乙醇消毒30s，再用0. 1 %的升汞消毒8min，然后用无菌水清洗三次后接种到1/2MS培养基中，在光照强度为15001x、每天光照10h、温度为20°C的培养室中进行培养， 培养3个月左右后，重楼种子长出胚根，开始萌发。
实施例2
将实施例1步骤O)中双氧水溶液的浓度改为采用1%，其它步骤同实施例1，重楼种子在培养5个月后长出胚根，开始萌发。
实施例3
将实施例1步骤(3)中赤霉素溶液的浓度改为400mg/L，其它步骤同实施例1，重楼种子在培养4个月后长出胚根，开始萌发。
权利要求
1. 一种有效解除重楼种子休眠的方法，其特征在于包括如下步骤(1)去除外种皮选择在重楼果实成熟、果皮开裂时采收种子，将新鲜重楼种子与湿沙子混合，以相互揉搓的方式及时清除重楼种子的外种皮，并用清水冲洗干净；(2)双氧水处理将除去外种皮的重楼种子用滤纸吸干水分后，放入1 3%的双氧水中浸泡5 10h，浸泡过程在0 8°C遮光条件下进行；(3)赤霉素处理将双氧水处理后的重楼种子先用滤纸吸干表面水分后，然后在18 25°C放置12 24h晾干，再将晾干后的种子放入200 400mg/L的赤霉素溶液中浸泡12 48h，浸泡过程在18 25°C遮光条件下进行；(4)萌发培养取出在赤霉素溶液中浸泡后的种子，用滤纸吸干水分后，放在超净台上先用70 75%的乙醇消毒30s，再用0. 1 0. 2%的升汞消毒4 lOmin，然后用无菌水清洗三次后接种到1/2MS培养基中，在光照强度为1000 18001x、每天光照8 12h，温度为 16 25°C的培养条件下进行培养。
全文摘要
本发明公开了一种有效解除重楼种子休眠的方法，该方法采用适宜浓度的双氧水与赤霉素溶液相结合的处理方式，有效地打破重楼种子的休眠，缩短了其种子后熟期，使重楼种子从自然条件下需要2年左右才能萌发缩短到只需3个月左右的时间，大大地缩短了重楼植物的栽培时间。
文档编号A01H4/00GK102487627SQ[1**********]
公开日2012年6月13日 申请日期2011年12月9日 优先权日2011年12月9日
发明者刘勇, 周杰, 张珏, 张红玉, 李文光, 江明殊, 王跃华, 田梦良, 薛惠玲, 藏薇, 陈燕 申请人:四川农业大学