[1**********]4 食品质量与安全 韩雪
第六章 微生物的生长及其控制
1、常用的微生物计数方法有哪些?
(1)测生长量:①直接法:测体积法、称干重法
②间接法:比浊法、生理指标法
(2)计繁殖数:①直接法:血球计数板法
②间接法:平板菌落计数法(浇注平板、涂布平板、滚管法)、
亨盖特滚管培养法、半固体深层琼脂法
2、微生物的典型生长曲线是如何绘制的?分为几个阶段,各有何特点?
以活菌数的对数值作为纵坐标,以培养时间作横坐标,画出一条由延滞期、指数期、稳定期。衰亡期4个阶段组成的曲线。
特点:①延滞期:生长速率常数为零;细胞形态变大或增长;细胞分裂迟缓,
合成代谢十分活跃;细胞内的RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈碱性;对外界不良条件反应敏感
②指数期:生长速率常数R最大;细胞进行平衡生长;酶系活跃,代谢
旺盛
③稳定期:生长速率常数R等于零;细胞总数最高,合成各类次生代谢
产物
④衰亡期:整个个体呈现负生长状态,代谢活性降低;细胞形态发生多
形化,自溶;有些进一步合成或释放对人类有益的次生代谢物
3、什么是微生物的连续培养?
连续培养是指向培养容器中连续流加新鲜培养液,使微生物的液体培养物长期维持稳定、高速生长状态的一种流溢培养技术,故它又称开放培养。
4、影响微生物生长的主要因素有哪些?各有什么特点?
①温度:不同微生物的生长温度有窄有宽,但都有生长温度三基点:最低生长
温度、最是生长温度、最高生长温度;最适生长温度并不是一切生理过程的最适温度
②氧气:按微生物对氧的需要或耐受力的不同,可将微生物分为专性好氧菌、
兼性厌氧菌、微好氧菌、耐氧菌、厌氧菌;
③pH:绝大多数微生物生长的pH都在 5到9之间,且也有三基点;不同种类
的微生物有最适生长pH,同一微生物在不同阶段不同的生理、生化过程中也有不同的最适pH要求;虽然微生物外环境的pH变化很大,但细胞内环境中的pH却很稳定。
5、实验室培养微生物的方法有哪些?各适用于哪些微生物?
(1)固体培养法:①好氧菌:试管斜面、琼脂平板、克氏扁瓶、茄子瓶 ②厌氧菌:高层琼脂柱、厌氧培养皿、亨盖特滚管技术、厌
氧罐技术、厌氧手套箱技术
(2)液体培养法:①好氧菌:试管液体培养、三角瓶浅层液体培养、摇瓶培养、
台式发酵罐
②厌氧菌:厌氧罐、厌氧手套箱、培养基中加上必要的物质
6、生产实践中微生物培养方法有哪些?
(1)固体培养法:①好氧菌:曲法培养
②厌氧菌:堆积培养法
(2)液体培养法:①好氧菌:浅盘培养、深层液体通气培养
②厌氧菌:厌氧发酵罐
7、比较灭菌、消毒和防腐的区别?
灭菌采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物(包括芽孢)永远丧失生长繁殖能力,对被灭菌的对象有伤害;消毒仅杀死物体白哦面或内部的一部分有害的病原菌,对被消毒的对象基本无害;防腐利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖
8、比较干热灭菌和湿热灭菌的区别?
干热灭菌把金属或洗干净的玻璃仪器放入电烘箱内,彻底灭菌(包括芽孢),干热可使细胞膜破坏、蛋白质变性、原生质干燥、各细胞成分氧化变质;湿热灭菌利用高温的水或水蒸气加压灭菌,其比干热灭菌的透射力强,且还能破坏蛋白质的氢键
9、评价化学杀菌剂、消毒剂、化学治疗剂的指标有哪些?
①最低抑制浓度(MIC):评价化学药物药效强弱。指在一定条件下,某化学药剂完全抑制特定微生物生长的最低浓度
②半数致死量(LD50):评定某药物毒性强弱。指在一定条件下,某化学药剂能杀死50%实验动物时的剂量
③最低致死量(MLD):评价某药物毒性强弱。指在一定条件下,某化学药物能引起实验动物群体100%死亡率的最低剂量
10、防止菌种衰退的方法有哪些?
①控制菌种传代次数
②创造良好的培养条件
③利用不易衰退的细胞移种传代
④采用有效的菌种保藏方法
11、菌种复壮的方法有哪些?
纯种分离法、通过宿主体内复壮、淘汰已衰退的个体
12、常用的菌种保藏方法有哪些?
半固体冰箱保藏法、斜面冰箱保藏法、液体石蜡保藏法、甘油悬液保藏法、砂土保藏法、冷冻干燥保藏法、液态氮超低温保藏法。